小鼠抗聚乙二醇IgM ELISA试剂盒是一种适用于检测和定量血清中PEG特异性抗体活性,或等离子体。仅供研究使用(RUO),不用于诊断,治愈或预防疾病。
作为Alpha Diagnostic International(ADI)在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐Alpha Diagnostic International(ADI)热销产品小鼠抗 PEG IgM,96 次检测,定量。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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小鼠抗 PEG IgM,96 次检测,定量 | ADI-PEG-040 | 查看 |
小鼠抗 PEG IgM,96 次检测,定量检测原理:
基于样品中的抗体与固定在微孔板上的PEG抗原的结合。通过抗物种抗体-HRP偶联物检测结合的抗体。经过洗涤步骤后,添加显色底物(TMB),并通过HRP底物产生颜色,该颜色与样品中抗PEG抗体的含量直接成比例。添加终止液以终止反应,然后使用ELISA读数器在450nm处测量吸光度。样品中抗体的存在是相对于抗PEG校准物来确定的。
检测限制
样品中抗体的定量
ELISA测量抗PEG活性,这是抗体浓度和对赫赛汀抗原的亲和力的组合。具有显著不同总Ig浓度的抗体可能显示出相似的抗赫赛汀活性,这是由于亲和力的差异。因此,样品的定量或活性应适当地以活性单位(滴度)而非Ig的质量单位(例如,ug/ml)来表示。
样品收集和处理
血清和其他生物液体可以作为样品使用,适当稀释以避免溶液基质干扰。对于血清,通过静脉采血,允许凝血,并在室温下通过离心分离血清。如果样品不会立即检测,可以冷藏保存数周,或冷冻长期保存。
在进行操作前请先查阅结果解释(第5-7页):
? 选择适当的样品稀释度,以考虑阳性的预期效力,最小化非特异性结合(NSB)和其他基质效应;例如,非免疫样品的净信号应低于1 U/ml校准物。这通常是对具有正常IgG和IgM水平的小鼠血清进行1:100或更大稀释度。
? 运行样品稀释液空白。这个信号是检测性能良好的指标,特别是洗涤效果,如果需要,用于净OD计算。空白OD应小于0.3。
? 运行抗PEG阳性对照;值范围在瓶标签上。
? 运行一套校准物,验证检测是否按照规格执行:10 U/ml应给出高信号(>1.5 OD);1 U/ml应给出低信号,可用于区分阳性/阴性阈值(见结果解释,第5页)。
板设置
将所有试剂预热至室温(18-30摄氏度)平衡(至少30分钟)。
? 确定检测运行的微孔数量。建议包括8个校准孔和每个样品对照的2个孔进行重复。
? 从袋中取出适当数量的微孔条,并把未使用的条重新放回袋中。重新密封袋并冷藏保存。
? 向每个孔中加入200-300ul工作洗涤液,让其静置约5分钟。在加入样品前,抽吸或倾倒液体并在纸巾上拍干。
检测性能
方法A. 抗体活性阈值指数
将样品与1 U/ml校准物或内部对照比较
=阳性/阴性截止值。
结果:
Alpha Diagnostic International(ADI)公司于1993年成立, 是一家美国私营生物技术公司,总部位于德克萨斯州圣安东尼奥,具有USDA认证的动物试验设施。公司致力于开发、制造和供应新型诊断和质量控制试剂及检测试剂盒,用于人类和动物的基础生物学和疾病研究。同时,还提供多肽合成定制服务和多抗产品以及其他抗体相关服务,例如纯化亲和素,酶耦联物,染料,荧光染料等。ADI旨在准确了解科学研究人员和诊断测试界的需求,并迅速提供有效的解决方案,成为科学界值得信赖的创新试剂和解决方案提供商。
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