Alpha Diagnostic International（ADI）人抗 PEG IgG ELISA 试剂盒检测原理

人抗聚乙二醇IgG ELISA试剂盒是一种适用于检测和定量血清中PEG特异性抗体活性，或等离子体。仅供研究使用（RUO），不用于诊断，治愈或预防疾病。

作为Alpha Diagnostic International（ADI）在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐Alpha Diagnostic International（ADI）热销产品人抗 PEG IgG ELISA 试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

人抗 PEG IgG ELISA 试剂盒检测原理：

抗PEG ELISA试剂盒基于绑定样本中的抗体PEG抗原固定在微孔。绑定抗体由抗种抗体HRP偶联物。a之后洗涤步骤，加入显色底物（TMB），颜色为由HRP底物直接开发与存在的抗PEG抗体的量成比例在样品中。添加停止解决方案以终止然后使用

450nm处的ELISA读数器。抗体的存在样品相对于抗PEG校准器进行测定。

检测设计和设置

样本收集和处理

可以使用经过适当稀释的血清和其他生物液体作为样本，以避免溶液基质干扰。对于血清，通过静脉采血，让血液凝固，并通过室温离心分离血清。如果样本不会立即检测，可以冷藏保存几周，或冷冻长期保存。

在继续之前，请先回顾结果解释（第5-7页）：

? 选择适当的样本稀释，考虑到预期的阳性效力和最小化非特异性结合（NSB）和其他基质效应；例如，非免疫样本的净信号应低于1 U/ml校准品。这通常是人血清中IgG和IgM正常水平的1:100或更高稀释。

? 运行一个样品稀释液空白。这个信号是检测性能的指标，特别是洗涤效率，并且用于净OD计算，如果需要的话。空白OD应小于0.3。

? 运行抗PEG阳性对照；值范围在瓶标签上。

? 运行一组校准品，验证检测是否按照规格执行：10 U/ml应给出高信号（>1.5 OD）；1 U/ml应给出低信号，可用于区分阳性/阴性阈值（见结果解释，第5页）。

板设置

将所有试剂预热至室温（18-30°C）平衡（至少30分钟）。

? 确定检测运行的孔数。推荐包括8个校准孔和每个待检测样本对照的2个孔进行复制。

? 从袋中取出适当数量的微孔条，并把未使用的条放回袋中。重新密封袋并冷藏保存。

? 向每个孔中加入200-300ul工作洗涤液，并让其静置约5分钟。在加入样本前，抽吸或倾倒液体并在纸巾上拍干。

结果解释

示例：

人血清/血浆IgG

一组未知历史的人体血清被测试是否含有抗PEG IgG（1:100稀释）。使用1 U/ml校准品计算阈值指数。

结果

抗PEG IgG：三个样本（E、H、J）在1:100稀释时为阳性（高于1.0阈值）；两个样本（B、M）为边缘值；其余样本为阴性。

当与PEG预吸收时，阳性样本转为阴性。

注释：

1. 阳性可能是由于之前接触过PEG，或者是先天免疫库的一部分。

2. 当阳性指数高于5.0时，使用稀释曲线计算滴度是更准确的定量方法（见方法C）。

3. 可以通过改变样本稀释来调整检测的灵敏度：a) 增加稀释（例如，1:200）以将边缘阳性的信号降低到阴性；b) 减少稀释（例如，1:50）将边缘样本转为阳性。对于后者，阴性的值可能会增加，因此应考虑使用已知阴性样本开发阳性指数或使用内部对照。

Alpha Diagnostic International（ADI）公司于1993年成立， 是一家美国私营生物技术公司，总部位于德克萨斯州圣安东尼奥，具有USDA认证的动物试验设施。公司致力于开发、制造和供应新型诊断和质量控制试剂及检测试剂盒，用于人类和动物的基础生物学和疾病研究。同时，还提供多肽合成定制服务和多抗产品以及其他抗体相关服务，例如纯化亲和素，酶耦联物，染料，荧光染料等。ADI旨在准确了解科学研究人员和诊断测试界的需求，并迅速提供有效的解决方案，成为科学界值得信赖的创新试剂和解决方案提供商。

艾美捷科技是Alpha Diagnostic International（ADI）的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。