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Saphir Bst Turbo GreenMaster冻干粉(Bst聚合酶):超快速和稳健扩增DNA

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-04-22     
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Saphir-Bst-Turbo-GreenMaster冻干液专为等温扩增DNA而设计。这种混合物是基于下一代基因增强的Bst聚合酶。该混合物是在恒定温度(60至65°C)下超快速和稳健扩增DNA的理想选择。该酶显示出高链置换活性,并产生高达109的扩增因子,这在PCR测定中相当于大约.30个循环。聚合酶比Saphir-Bst聚合酶(#PCR-389/#PCR-388/#PCR-387)快2-3倍,并且允许在5-10分钟内检测靶基因。

 

艾美捷Saphir Bst Turbo GreenMaster冻干粉/Bst聚合酶(PCR-395S):

Saphir Bst Turbo GreenMaster冻干粉:包含Saphir Bst Turbo 聚合酶、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)、反应缓冲液、绿色DNA嵌入染料、添加剂和稳定剂以及PCR级水。

处理:Saphir Bst Turbo Green 大师冻干粉以8管条或96孔板的形式提供,预装有完整的主混合物,以干燥、室温稳定的格式。这种冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需进行冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤Z小化了错误或污染的风险。每个小瓶包含进行20 μl LAMP(环介导等温扩增)检测所需的所有组分(除了引物和模板)。要执行检测,只需将小瓶用引物混合物填充并加入DNA模板。这种冻干粉还可以与ROX参照染料一起使用,在兼容ROX信号评估的PCR仪器中。在这种情况下,ROX染料(#PCR-351)应以1倍浓度添加到PCR反应中。

检测设计:等温扩增是一种极其敏感的检测方法,应当注意避免实验设置区域和设备与之前反应的DNA发生污染。一个可能出现的问题是,由于携带污染或非特异性退火引物或引物二聚体形成,导致无模板对照中出现扩增。

引物设计:通常,使用4种不同的引物来识别6个不同的DNA区域,允许特定目标基因的扩增。额外一对引物可以进一步加速扩增,将总检测时间缩短至10-20分钟。由于反应序列复杂,手动设计引物可能具有挑战性。为了简化设计过程,建议使用引物设计软件。由于计算机设计的引物在灵敏度和非模板扩增方面可能会有所不同,建议在Z终选择之前评估2-4组真实引物集。

检测设置:

使用无菌过滤头进行移液,并在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。所有扩增中都应包括无模板对照。

首先,准备一个10倍浓度的引物预混合液。其次,设置等温扩增检测:

Bst聚合酶


分配主混合物:将引物/探针混合物彻底振荡(Vortex)以确保均匀性。向每个PCR管或板孔分配20微升(μl)。

? 使用特定的等温扩增检测仪器或实时PCR循环仪来运行检测。

? 将仪器设置为在60至65°C之间的恒定孵化温度(取决于引物退火温度)。

? 以1分钟的间隔测量荧光强度,持续Z多30分钟。

运输:在常温下运输。

储存条件:在常温下储存。

附加储存条件:应存放在镀铝袋中或干燥的地方。当密封打开时,冻干粉在湿度水平超过70%的情况下可能会吸湿。

保质期:密封包装内6个月。

 

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