生物素-11-dUTP在酶的作用下被嵌入到DNA/ cDNA中,作为其天然对应物dTTP的替代品。由此产生的生物素标记的DNA/cDNA探针随后使用与辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)、荧光染料或琼脂糖/磁珠结合的链霉亲和素进行检测。通过在尿嘧啶的C5位置附加一个11个原子的连接臂,确保了合适的底物特性以及高效的标记效率和对生物素部分的有效检测。推荐在PCR和缺口翻译中使用的生物素-11-dUTP/dTTP比例为:50%生物素-11-dUTP / 50% dTTP。
请注意:生物素-11-dUTP的最终浓度可能会根据应用和检测条件而有所不同。为了获得合适的产品质量和高结合率,建议对生物素-11-dUTP/dTTP比例进行个别优化。
Biotin-11-dUTP、生物素化核苷酸结构式
艾美捷Biotin-11-dUTP,生物素化核苷酸(NU-803-BIOX-S):
运输:通过凝胶包进行运输。
存储条件:应在-20°C的环境下保存。
短期(累积不超过1周)暴露于环境温度下是允许的。
保质期:自交货之日起12个月。
分子式:C28H45N6O17P3S(自由酸形式)。
分子量:862.67克/摩尔(自由酸形式)。
精确质量:862.18克/摩尔(自由酸形式)。
纯度:高于或等于95%(通过高效液相色谱法测定)。
形态:在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液,分子量截留30 kDa。
颜色:无色至淡黄色。
浓度:1.0 mM至1.1 mM。
pH值:7.5,误差范围±0.5。
光谱特性:zui大吸收波长λmax为240/289纳米,摩尔吸光系数ε为10.7/7.1 L·摩尔^-1·厘米^-1(Tris-HCl,pH 7.5)。
Biotin-11-dUTP,生物素化核苷酸参考文献:
[1] Day et al. (1990) Synthesis in vitro and application of biotinylated DNAprobes for human papilloma virus type 16 by utilizing the polymerase chainreaction. Biochem J 267:119.
[2] Ried et al. (1992) Simultaneous visualization of severe different DNA probesby in situ hybridization using combinatorial fluorescence and digital imagingmicroscopy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:1388.
[3] Langer et al. (1981) Enzymatic synthesis of biotin-labeled polynucleotides:novel nucleic acid affinity probes. Proc Natl Acad Sci USA 78:6633.
[4] Brigati et al. (1983) Detection of viral genomes in cultured cells and paranembedded tissue sections using biotin-labled hybridization probes. Virology126:32.
[5] Day et al. (2008) Microfluidic-based enzymatic on-chip labeling of miRNAs.N Biotechnol 25:142.
[6] Flickinger et al. (1992) Differential incorporation of biotinylated nucleotidesby terminal deoxynucleotidyl transferase. Nucleic Acids Res 20:2382.
[7] Anderson et al. (2005) Incorporation of reporter-labeled nucleotides by DNA polymerases. Biotechniques 38:257.Moritz et al. (2014) Simple methods for the 3’ biotinylation of RNA. RNA. 20(3):421.
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