Cytoskeleton 肌球蛋白S1片段 （心脏），牛心脏生物活性测定

心肌球蛋白已从牛心脏组织中纯化（1，2）。全长肌球蛋白用其必需轻链（ELC）和调节轻链（RLC）纯化，见图1和2。然后用α-胰凝乳蛋白酶消化肌球蛋白酶以释放可溶性亚片段-1（S1）结构域，该结构域通过离心分离（3）。纯化的肌球蛋白S1片段已被确定为在F-肌动蛋白激活的ATP酶测定中具有生物活性（参见生物活性测定）。牛心肌球蛋白S1片段蛋白以白色冻干粉末形式提供。  

作为Cytoskeleton全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cytoskeleton热销产品肌球蛋白S1片段 （心脏），牛心脏。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。   

Cytoskeleton公司目前主要的产品有340余种，其产品主要覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒，并且产品线还在不断的扩大中。

肌球蛋白S1片段 （心脏），牛心脏特点：

钙激活肌球蛋白ATP酶活性与细丝结合时的测量。

鉴定/表征影响 TT 复合物调节和肌球蛋白 ATP 酶活性的蛋白质或小分子 

鉴定/表征影响肌球蛋白/F-肌动蛋白相互作用的蛋白质或小分子  

图1：肌球蛋白及其亚片段的示意图 肌球蛋白是一种六聚体蛋白，由两条重链和两条轻链组成。肌球蛋白可在镁存在下通过α-胰凝乳蛋白酶蛋白水解裂解成重美肌蛋白酶（HMM）和轻肌球蛋白酶（LMM）。然而，在存在 EDTA 的情况下，α-胰凝乳蛋白酶会产生可溶性肌球蛋白酶 S1 片段 （3）。	图2：全长和 S1 肌球蛋白使用20-1%SDS-PAGE凝胶通过电泳分离4 μg全长牛心肌球蛋白（泳道A）和相应的S20肌球蛋白（泳道B）样品，并用考马斯蓝染色.箭头表示肌球蛋白重链（约200 kDa），箭头表示RLC（约20 kDa）和两种ELC亚型（约25和21 kDa）。使用精密红色?蛋白测定试剂（Cat.# ADV02）进行蛋白质定量。Mark12分子量标记物来自Invitrogen。

存储和共振

短暂离心以收集管底部的产品。用 1 ul Milli-Q 水（03 mg 瓶为 300 ml）重建 3 mg 管 MYS10 将在以下缓冲液中产生 3.3 mg/ml 心脏 S1 肌球蛋白储备：20 mM PIPES pH 7.0，5% （w/v） 蔗糖和 1% （w/v） 葡聚糖。蛋白质不应暴露于重复的冻融循环中。冻干蛋白在4°C干燥（<10%湿度）下稳定1年。  

纯度

蛋白质纯度通过在4-20%梯度聚丙烯酰胺凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白质的密度测定来确定。测定用于产生肌球蛋白S1片段的肌球蛋白及其轻链纯度为90%（见图2）。

肌球蛋白S1片段 （心脏），牛心脏生物活性测定：

牛心肌球蛋白S1片段的生物活性可以通过其F-肌动蛋白活化的ATP水解速率来确定。该测定通过首先聚合肌动蛋白形成Factin，然后将心脏原肌球蛋白/肌钙蛋白复合物（TT复合物）与肌动蛋白丝以化学计量量混合。这会产生类似于肌肉纤维细丝的涂层细丝。肌球蛋白以亚化学计量量添加，并用ATP和钙引发反应。严格的质量控制确保在没有钙的情况下，TT复合物完全抑制肌球蛋白ATP酶。加入10uM钙肌球蛋白ATP酶将恢复。钙与肌钙蛋白C结合，肌钙蛋白C与F-肌动蛋白解离，使肌球蛋白结合。  

Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。