HybriDetect 2T试纸条（MGDS2A）测定性能&结果解读

HybriDetect通常用于DNA扩增产物的快速检测。许多客户会使用带有Biotin、FITC/FAM修饰的引物，反应产物包含这些标签，从而可以在HybriDetect试纸条上被检测到。如PCR和多种等温扩增技术(如LAMP-LFA)均可以和HybriDetect一起应用。此外，由于标记探针的特异性杂交，这种方法允许大量核酸(如核糖体RNA)的直接检测（无需扩增）。

艾美捷通用侧流式试纸条：HybriDetect 2T试纸条（MGDS2A）：用于同时检测用FITC、生物素和地高辛标记的两种不同分析物（蛋白质、基因组扩增产物）的通用侧流式试纸条。REF: MGHD 2 1；规格：100 Texts

方法：

Milenia HybriDetect 2T是一种即用型通用试纸条（浸渍棒），基于使用金颗粒的侧流技术。该试纸条旨在开发用于同时检测两种不同分析物（如蛋白质、抗体或基因扩增）的定性或定量快速测试系统。用户需要开发两种特异性分析物溶液。溶液A：含有用FITC标记的第一探针（例如抗体、抗原、特异性探针）和用生物素标记的第二探针（例如抗体、引物）。溶液B：同样含有用FITC标记的第一探针（例如抗体、抗原、特异性探针）和用地高辛标记的第二探针（例如抗体、引物）

待测样品与开发的分析物特异性溶液混合后，将试纸条放入该溶液中。

用FITC和生物素标记的分析物A复合物首先与试纸条的样品施加区域中标记有金的FITC特异性抗体结合。用FITC和地高辛标记的分析物B复合物也与试纸条的该区域结合。毛细力使金复合物A和B扩散到分析膜上。只有被捕获的金颗粒分析物在溢出相应测试带（测试带A-分析物A，测试带B-分析物B）时，与固定的生物素配体分子结合，并随时间生成红蓝色带状。未被捕获的金颗粒流过控制带，并被物种特异性抗体固定在那里。随着孵育时间的增加，会形成一个颜色浓烈的控制带。

PCR产物测定性能：

1. 从容器中取出所需数量的试纸条并标记它们。

2. 对于每个待分析的样品，将100 uL HybriDetect测定缓冲液或个别开发的缓冲液移液到反应管或微孔板的孔中。

3. 直接将5-10 uL的杂交产物移液到样品施加区域，或者选择将5-10 uL的杂交产物加入反应管/孔中的溶液中。

4. 将试纸条的样品施加区域放入溶液中，并以直立的姿势孵育，例如5-15分钟。

5. 孵育结束后，将试纸条从测定溶液中取出，并立即解读测试结果。

注意：

如果需要更高的分析灵敏度，增加PCR产物的体积可能会有所帮助。体积、特定于分析物的溶液和孵育时间始终是个别测试开发的一部分。

测定性能 "RPA产物"

1. 从容器中取出所需数量的试纸条并标记它们。

2. 对于每个待分析的样品，将80 uL HybriDetect测定缓冲液（MGCBB）移液至反应管或微孔板的孔中。

3. 在RPA反应后，用HybriDetect测定缓冲液（MGCBB）稀释RPA反应混合物1/50或1/25（用于更高的灵敏度），并直接加载10 ul至样品施加区域。

4. 将已加载的试纸条的样品施加区域放入准备好的溶液中（参见第2点），并以直立姿势孵育，例如5-15分钟。

孵育结束后，将试纸条从测定溶液中取出，并解读测试结果。

结果解读

应用内部PCR控制：

虽然生物素标记的扩增物A主要用于检测特定目标序列，但地高辛标记的扩增物B被提供作为内部PCR扩增控制。

PCR测定的灵敏度：

Milenia HybriDetect 2T的分析灵敏度相当于琼脂糖凝胶电泳和随后用溴化乙锭染色。不受PCR产物大小和扩增循环数的影响，可以检测到低至5 pg的DNA。

警告和注意事项：

1.所有试剂应在原始容器中存放在 2-8 ℃的环境中。

2.使用前，将所有试剂恢复至室温（18-28 ℃）。

3.必须遵守所有组分的有效期限。

4.保护检测条免受湿气影响；容器必须始终密封。

5.只接触和标记检测条的箔纸覆盖区域（标记区域）。

6.废弃物的处理必须按照当地的法规进行。

7.检测缓冲液含有抗微生物试剂，因此避免与皮肤和/或黏膜接触。

8.适用于专业用户。