肌纤维是肌肉组织的组成部分,由肌细胞组成。根据其形态和功能特征,肌纤维可以分为平滑肌(也称为非横纹肌)、骨骼肌和心肌。有许多染色肌纤维的方法,例如Mallory的PTAH方法、Aniline Blue方法和磷钨酸-血红素(PTAH)方法。最初,当磷钨酸-血红素染色溶液被发明时,Mallory的PTAH方法包括各种磷钨酸-血红素方法。大约在1900年左右,Mallory将磷钨酸溶液和血红素染料结合在一起,发现这种组合对肌纤维有良好的染色效果。
如今广泛使用的染色溶液是Mallory的磷钨酸-血红素染色溶液(PTAH自然氧化法)。血红素可以通过PTAH方法进行化学氧化,但其保存时间较短,染色力容易降低。尽管自然氧化需要时间,但所得到的血红素可以在两年以上的时间内保持染色力,成为理想的染色溶液。它适用于中枢神经系统、一般组织结构以及使用标准固定剂固定的组织的染色。染色时间根据制备方法、使用的固定剂和所展示的组织结构而有所不同。
Mallory的磷钨酸-血红素染色溶液(PTAH化学氧化法)主要由PTAH氧化剂、草酸溶液和Mallory的PTAH染色溶液组成。Mallory的PTAH染色溶液是一种经过化学成熟的染料,在短时间内提供良好的染色力,不应长时间存储。它常用于展示横纹肌的横纹和诊断横纹肌肉瘤。横纹肌肉瘤呈现出多样的组织学变化,很难与未分化的间叶性肿瘤区分开来。通过使用磷钨酸-血红素染色,如果在肿瘤细胞的细胞质中发现蓝色的横纹,可以确认肿瘤具有横纹肌分化。该染色试剂盒还可用于染色炎症渗出物中的纤维素、DIC毛细血管中的纤维素和神经组织学。
艾美捷Mallory磷钨酸苏木素染色液相关参数:
Mallory磷钨酸苏木素染色液使用方法:
1. 将组织固定在10%福尔马林固定剂中,并进行常规脱水和包埋。
2. 切割4μm厚的石蜡切片,并进行常规脱蜡至水。
3. 在新鲜配制的PTAH氧化剂中氧化5分钟。
4. 用水简单冲洗。
5. 在草酸溶液中漂白1-2分钟。
6. 用自来水冲洗2分钟,然后用蒸馏水冲洗。
7. 在Mallory的PTAH染色溶液(化学氧化法)中孵育24-48小时(覆盖容器)。
8. 取出玻片,并迅速用95%乙醇洗去多余的染色溶液。
9. 进行常规脱水、透明化处理,并使用中性封片介质封片。
注意事项:
1. 如果横纹的蓝色不足或呈现明亮的红色,说明氧化时间不足或可能过度氧化,需要更换或重新配制染色溶液。
2. 染色后不要用水冲洗Mallory的PTAH染色溶液。在用95%乙醇洗涤时,应迅速进行,因为长时间用水或乙醇洗涤会洗掉磷钨酸-血红素的染色。
3. Mallory的PTAH染色溶液是一种渐进染色,不要过度染色。染色24小时后,可以取出玻片,在显微镜下观察染色程度。
4. 为了您的安全和健康,请在操作过程中穿实验服和一次性手套。
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