Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒常见问题

Calcein, AM,中文名钙黄绿素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一种具细胞膜渗透性的活细胞荧光染料,呈绿色荧光(Ex/Em= 490nm/515nm)。AM基团的存在不仅加强疏水性,使其能轻易穿透活细胞膜。而且封闭结合钙离子的分子部分,本身不发荧光。一旦进入细胞后,被细胞内酯酶水解为钙黄绿素(calcein),能与胞内钙离子结合,产生强烈的绿色荧光。因不具有细胞膜渗透性,从而被保留在胞内。与其它活细胞染料(如BCECF-AM,CFDA)相比,Calcein, AM最适合用于活细胞染色探针,因细胞毒性很低,而且不会抑制任何细胞功能如增殖或淋巴细胞趋化性。另外,使用Calcein, AM活性检测的实验结果十分可信,与标准的51Cr释放法所得结果一致。

由于死细胞缺乏酯酶,Calcein, AM仅对活细胞进行标记,这一特征使其非常适合用来检测细胞活力和细胞的短期示踪。常常与碘化丙啶PI联合使用,因其仅能穿过死细胞膜的无序区域到达细胞核,嵌入细胞的DNA双螺旋区域,并产生红色荧光(Ex/Em= 535nm/617nm),仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发,仅可观察到死细胞。结合这些特点,Calcein, AM和PI经常被结合用作活细胞和死细胞的双重染色。

本试剂盒就是结合Calcein-AM和PI的双重染料,来进行活细胞和死细胞的双重染色标记,从而进行活细胞和死细胞水平的分析。根据试剂盒优化体系,单次以200μl细胞悬液进行染色,可做500次检测。

艾美捷 Biogradetech Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒：

中文名称：Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒

英文名字：Calcein-AM/PI, Live/Dead Cell Double Staining Kit

Biogradetech货号：B-CHK103-500T

规格：500T

保存建议：Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒保存：-20℃干燥避光 有效期一年。

Calcein-AM/PI，活细胞/死细胞双染试剂盒常见问题：

1、 该试剂盒适用任何细胞类型?

基本上适用于任何含酯酶活性的动物细胞。植物和细菌细胞因含有细胞壁,Calcein-AM不能进入因此无法染色。有可能对原生质体进行染色。

2、 用相同浓度有可能对所有哺乳动物细胞进行染色?

对所有细胞都用相同的浓度是很不合理的。Calcein-AM和PI的最佳工作浓度根据细胞类型差异很大。有必要根据具体细胞来确定最佳染料浓度。参考说明书染料工作浓度优化方法。

3、 Calcein-AM对细胞有毒?

与其他相似的活细胞染料比较,Calcein-AM基本无毒(毒性最小)。

Biogradetech全球生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商：Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。