eENZYME-KlenThermase DNA聚合酶的应用和特异性分析

eENZYME-KlenThermase?DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶的优化版本，设计用于双脱氧核苷酸的循环测序。建议将该酶用于35S标记的手动DNA测序和自动荧光DNA测序。突变已被引入KlenThermase?DNA聚合酶的活性位点，提高了其赋予脱氧核苷酸和双脱氧核苷酸极高酶特异性和高保真掺入的能力。建议通过等位基因特异性PCR（AS-PCR），等位基因特异性引物延伸（AS-PEX）和微型测序程序将KlenThermase?用于SNP基因分型。

艾美捷eENZYME-KlenThermase DNA 聚合酶：

货号：GC-018-1000

应用：设计用于带有35 S 标签的手动 DNA 测序和自动荧光 DNA 测序，包括通过等位基因特异性 PCR (AS-PCR)、等位基因特异性引物延伸 (AS-PEX) 和小型测序程序进行 SNP 基因分型。

浓度：25单位/微升

单位定义：一个单位被定义为在检测条件下（25 mM TAPS（三（羟甲基）甲烷氨基丙烷磺酸，钠盐）pH 9.3（25℃时），50 mM KCl，2 mM MgCl2，1 mM β-巯基乙醇和活化的小牛胸腺DNA作为底物），在72°C下30分钟内将10纳摩尔的dNTPs整合成酸不溶形式的酶量。

储存缓冲液：10 mM K-磷酸盐缓冲液 pH 7.0，100 mM NaCl，0.5 mM EDTA，1 mM DTT，0.01% Tween 20；含50%（体积比）甘油。

反应缓冲液：500 mM KCl，100 mM Tris-HCl（pH 9，25℃时），1% Triton X100。额外溶液：50 mM MgCl2，将MgCl2添加至最终浓度为3.5 mM。缓冲液未提供。

储存温度：在0°C以下储存Klenow酶M DNA聚合酶，最好在-20°C的恒温冰箱中。避免反复冻融。

保质期：在适当的储存条件下（-20℃），自收到之日起18个月。

特性：保真性：与全长的Taq DNA聚合酶相比，KlenThermaseTM在聚合过程中的相对突变率低两倍。

循环测序：缺乏5'-3'外切酶活性使得KlenThermase M特别适合于循环测序。它能产生更高的序列强度和非常低的背景。突变优化提高了条带强度的均匀性。将KlenThermase M与Tth无机焦磷酸酶结合，产生均匀的条带，提高测序准确性并增加读取长度。

内容物：KlenThermaseTM DNA聚合酶（25 U/μl），1000单位。

eENZYME-KlenThermase DNA 聚合酶文献引用：

Dwight, Z. L., Palais, R., Kent, J. & Wittwer, C. T. Heterozygote PCR Product Melting Curve Prediction. Hum. Mutat. 35, 278–282 (2014).

eENZYME-KlenThermase DNA 聚合酶相关产品：

EU-Taq DNA 聚合酶，高纯度

抗 Taq 小鼠单克隆抗体，克隆 B-22

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