QA-Bio-酶解DeglycMx 试剂盒的使用说明

QA-Bio-酶解DeGlycoMx?试剂盒将从糖蛋白中去除牛的N-连接寡糖和许多O-连接寡糖。使用酶PNGase F去除N-连接（Asnlinked）。此外，所有Ser/Thr连接（O-连接）的Gal-（β1-3）-GalNAc-（α1）和所有唾液酸取代的Gal-。添加β-半乳糖苷酶和氨基葡萄糖苷酶将有助于较大O-连接结构的脱糖。

艾美捷酶解DeglycMx?试剂盒：

产品编号：KE-DGMX

存储：4°C。

试剂盒内容：

试剂盒包括所需的酶和试剂，用于移除所有的N-连接寡糖和大多数O-连接糖。每个试剂盒可以在10次反应中脱糖基超过0.5毫克的糖蛋白。

酶：

提供的酶为一种20微升预混合鸡尾酒，包括：

PNGase F（脑膜炎奈瑟菌）25毫单位（mU）

O-糖苷酶（肺炎链球菌）6.25毫单位

神经氨酸酶（尿素分解短杆菌）25毫单位

β-半乳糖苷酶（肺炎链球菌）15毫单位

葡萄糖胺苷酶（肺炎链球菌）5毫单位

其他提供的试剂：

5倍反应缓冲液 - 200微升，250毫摩尔的磷酸钠，pH 7

变性溶液 - 100微升

Triton X - 100微升

稳定性：

几天内暴露在常温下不会降低活性。如果适当储存，至少稳定12个月。

酶解DeglycMx?试剂盒的使用说明：

1、在1.5毫升管中，将10微升的5倍反应缓冲液与高达50微克的糖蛋白混合在33微升的蒸馏水中。

2、加入2.5微升的变性溶液。轻轻混合后放入沸水浴中5分钟。然后在冰上冷却。

3、加入2.5微升的Triton-X。

4、加入2微升的DeGlycoMx酶混合物。在37°C下孵化3小时。 注意：变性可以将酶消化的速率提高至10倍。如果不需要变性，省略步骤2-3，加入5微升的蒸馏水，并将孵化时间增加至24小时。脱糖基的效率可以通过在SDS-PAGE凝胶上运行样品来测试。