基于J2的双链RNA ELISA试剂盒—无需额外验证

J2已被用于阐明抗病毒反应是如何启动的，病毒采取了哪些反策略来避免它们，并通过对病毒核酸复制位点进行超微结构定位研究来探索病毒生命（Welsch等人，2009&Knoops等人，2011）。J2也被推荐作为诊断工具，以检测未确定的病原体本质上是细菌还是病毒（Richardson等人，2010）。最近，J2也被用于监测体外合成的mRNA制剂中dsRNA的去除，这些制剂可能在基因治疗中具有潜在的用途（Kariko等人，2011）。J2已成功用于各种免疫捕获方法，例如ELISA中。

艾美捷基于J2的双链RNA ELISA试剂盒 #KBBA56：

校准器范围：0 纳克/毫升 - 200 纳克/毫升

敏感性：~1.5 纳克/毫升

样品类型：细胞培养上清液和生物制剂

运输条件：2 - 8 摄氏度

检测方法：450 nm 比色法

用法：仅供研究使用

基于J2的双链RNA ELISA试剂盒检测原理：

KRIBIOLISA 双链 RNA （dsRNA） ELISA 采用定量夹心酶免疫测定技术。它基于使用两种双链RNA（dsRNA）特异性单克隆抗体，可以灵敏和选择性地检测dsRNA分子（>=40 bp），而不受其核苷酸组成和序列的影响。dsRNA （J2） 抗体预包被到微孔上。将样品和标准品移液到微孔中，并由捕获抗体结合。然后，将HRP（辣根过氧化物酶）偶联的抗dsRNA （K1）移液并孵育。洗涤微孔以去除任何非特异性结合后，将即用型底物溶液（TMB）添加到微孔中，颜色与样品中dsRNA的量成比例发展。然后通过添加终止溶液停止显色。在450nm处测量吸光度。

基于J2的双链RNA ELISA试剂盒检测程序：

使用前将所有试剂置于室温。强烈建议所有控件和示例应重复或一式三份运行。

在各自的孔中加入100ul制备的阳性对照/标准品和样品。

密封板并在 37*C 下孵育 120 分钟。

吸出并用洗涤缓冲液（4X）洗涤板1次，并通过在吸收纸上用力倒置板来吸干残留缓冲液。擦拭微量滴定孔外底部的任何液体，因为任何残留物都会干扰读数步骤。

向所有孔中加入100ul的dsRNA特异性K1检测：HRP偶联物。

密封板并在 37*C 下孵育 60 分钟。

重复洗涤步骤（4）。

在每个孔中加入100ul的TMB底物。

将微孔板在室温下在黑暗中孵育30分钟。请勿摇晃，否则可能会导致更高的背景和更差的精度。阳性孔应变成蓝色。

移出 100 ul 的停止溶液。井的颜色应该从蓝色变成黄色。11.用酶标仪读取450nm处的吸光度。