BiogradeTech 简简单单搞定彗星实验

彗星实验（Comet assay）也被称为单细胞凝胶电泳实验（Single cell gel electrophoresis，SCGE），是一种超灵敏的单细胞水平上检测DNA损伤的技术， 是由Ostling等研究者于1984年首次提出的一种通过检测DNA链损伤来判别遗传毒性的技术。可以检测到细胞中的DNA断裂,甚至检出例如自然光照射体外淋巴细胞1h后引起的DNA损伤。

当各种内源性和外源性 DNA 损伤因子诱发细胞 DNA 链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA 以及其他成分均扩散到电解液中，而核DNA由于分子量太大不能进入凝胶而留在原位。电泳过程中，如果DNA没有损伤，则将停留在原位，染色后呈圆形的荧光团，无拖尾出现。如果DNA受损，断裂的碎片进入到凝胶中，在电场的作用下，DNA碎片离开原位向阳极迁移，形成拖尾。

实验步骤

该彗星实验法检测低浓度遗传毒物具有高灵敏性，研究的细胞不需处于有丝分裂期。同时，这种技术只需要少量细胞。

·制备单细胞悬浮液，在 37℃ 条件下，悬浮液与低熔点琼脂糖（LM琼脂糖）混合；

·将琼脂糖、细胞混合物涂布在预处理的载玻片上；

·4℃条件下用裂解液处理30-60min或过夜，裂解液由去垢剂及高盐溶液组成，可去除多余的细胞膜及组蛋白；

·将载玻片浸入电泳溶液中；

·进行凝胶电泳，随后，中和载玻片，待LM琼脂糖完全干燥后，用荧光染料染色，并于荧光显微镜下观察DNA损伤程度。

产品优势

试剂整齐安全可靠：提供特色涂层多孔彗星玻片，增加凝胶与载玻片粘附力，有效降低脱胶风险。

优点：操作简便：无需用不同熔点琼脂糖繁琐铺胶，可快速、灵敏的检测细胞 DNA 损伤。

实验效果展示

Biogradetech 彗星试剂盒检测Jurkat细胞的DNA 损伤，并和A品牌进行比较。彗星试剂盒检测不仅步骤更简便，省时高效，且荧光较亮，样本不易脱落，可形成稳定鲜亮的结果。

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