Jena Bioscience/艾美捷CuAAC细胞反应缓冲液套件的组成及应用探究

铜 ( Cu (I)) 催化的叠氮化物-炔烃 C 反应 ( CuAAC )描述了叠氮化物官能化分子 A 与末端炔烃官能化分子 B 的反应，通过该反应产生稳定的缀合物 AB三唑部分。

由于末端炔烃对叠氮化物相当不活泼，因此 CuAAC 反应的效率很大程度上取决于金属催化剂的存在，例如 +1 氧化态的铜离子 (Cu(I))。

可以使用不同的铜源、还原剂和 Cu(I) 稳定配体，但是，对于大多数生物共轭应用，可将 Cu(II) 盐 CuSO 4作为铜源、水溶性 Cu(I) 稳定配体（例如 BTTAA）和推荐使用抗坏血酸钠作为还原剂。[1-3]

使用Picolyl-Azide试剂代替传统的Azide试剂可以进一步提高反应效率，并由于内部铜螯合部分而降低所需的最终CuSO 4浓度。[4]

CuAAC 细胞反应缓冲液试剂盒（基于 BTTAA）适用于对含有代谢功能化炔烃或叠氮化物修饰生物分子的细胞进行铜 (Cu(I)) 催化叠氮化物-炔点击化学反应 (CuAAC)。

Jena Bioscience试剂盒提供足够的量以进行50 次 CuAAC 实验 à 500 ?l，使用 2 mM CuSO 4（铜源）、10 mM BTTAA（Cu(I) 稳定配体）和 100 mM 抗坏血酸钠（还原剂）在 100 mM Na-溶液中进行。磷酸盐反应缓冲液。

艾美捷Jena Bioscience CuAAC细胞反应缓冲液套件（基于BTTAA）#CLK-073参数：

适合一般实验室使用。

运输：在环境温度下运输

储存条件：储存在 4 °C 下

可以短期暴露于环境温度（累计最多 1 周）。

保质期：交货后12个月

Jena Bioscience-CuAAC细胞反应缓冲液套件含量：

铜源：

2 x 10 mg CuSO 4 (M = 159.6 g/mol)，#CLK-MI004)

Cu(I) 稳定配体：

5 x 25 mg BTTAA（M= 430.5 g/mol，#CLK-067）

还原试剂：

4 x 200 mg 抗坏血酸钠（M = 198.1 g/mol，#CLK-MI005）

反应缓冲液：

2 x 30 ml 无菌 100 mM 磷酸钠缓冲液，pH 7

10 ml 无菌 ddH 2 O

需要但未提供的材料：

炔或叠氮化物功能化的底物，例如含有代谢功能化的炔或叠氮化物修饰的生物分子的固定和透化细胞。

(吡啶基)-叠氮化物或炔烃检测试剂和适当的溶剂（例如DMSO）

用于标记固定和透化的细胞：

洗涤溶液，例如含有 3% BSA 的 PBS

固定溶液，例如含有 3.7% 甲醛的 PBS

透化溶液，例如含有 0.5% Triton X-100 的 PBS

用于成像的封固剂

其他标记试剂，例如核染色剂或抗体

Jena Bioscience-CuAAC细胞反应缓冲液套件文献参考：

[1] Presolski et al. (2011) Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Click Chemistry for Bioconjugation. Current Protocols in Chemical Biology 3:153.

[2] Hong et al. (2011) Analysis and Optimization of Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition for Bioconjugation. Angew. Chem. Int. Ed. 48:9879.

[3] Besanceney-Webler et al. (2011) Increasing the Efficiacy of Bioorthogonal Click Reactions for Bioconjugation: A Comparative Study. Angew. Chem. Int. Ed. 50:8051.

[4] Uttamapinant et al. (2012) Fast, Cell-Compatible Click Chemistry with Copper-Chelating Azides for Biomolecular Labeling. Angew. Chem. Int. Ed. 51:5852.

JenaBioscience的主要产品包括核苷/核酸制品系列（包括合成的类似物）、重组蛋白及蛋白表达系统、点击化学产品系列、在结构学研究方面全面提供晶体筛选试剂盒、优化试剂、工具和各类耗材等。此外，还提供分子生物学和生物化学研究的定制试剂与研究服务。艾美捷科技是Jena Bioscience的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。