永生化小鼠雪旺细胞使用协议

施万细胞是研究涉及糖基化、再生能力降低、氧化应激以及其他神经退行性疾病的糖尿病神经病变发病机制的宝贵工具。这种永生化小鼠施万细胞表达胶质细胞标记物（S100、GFAP、p75NTR）、参与施万细胞发育和周围髓鞘形成的转录因子（Krox20、Oct6、PAX3 和 SOX10），以及神经营养因子（NGF、BDNF、GDNF 和 CNTF）。

在生长因子如血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）、酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）、β成纤维细胞生长因子（bFGF）或转化生长因子-β1（TGF-β1）存在的情况下，这些细胞会表现出有丝分裂反应。IMS32 细胞可用于研究涉及周围神经再生的作用机制，以及作为评估神经系统疾病发病机制的体外模型。使用免疫反应性来检测细胞标记物。

艾美捷abm永生化小鼠雪旺细胞基本参数：

货号：T0295

名称：永生化小鼠施万细胞（IMS32）

生物体：小鼠（M. musculus）

组织：大脑

供体历史：ICR 小鼠

生长特性：贴壁，纺锤形

细胞类型：永生化细胞

储存条件：液氮的气相，或低于-130°C。

运输条件：干冰运输。

产品格式：冷冻

预期用途：本产品仅用于实验室研究。不适用于任何动物或人类的治疗用途，任何人类或动物的消费，或任何诊断用途。

生物安全等级：II

生长条件：

建议使用 PriCoat? T25 烧瓶（G299）或应用细胞外基质（G422）以促进细胞对培养容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO?。

拆包和储存说明：

1. 目视检查包装容器是否有泄漏或破损的迹象。

2. 立即将干冰包装中的冷冻细胞转移到低于-130°C的温度中，最好在液氮气相储存，直到准备使用。

为了确保Z高的活性水平，在收到后尽快解冻小瓶并开始培养。如果需要继续储存，小瓶应仅储存在低于-130°C或液氮气相中。不要在-70°C下储存，因为这会导致活性丧失。

解冻协议：

1. 在37°C水浴中快速摇晃解冻细胞（最多2分钟）。瓶盖应保持在水面之上，以最小化污染风险。

2. 用70%乙醇喷洒并擦拭瓶身外部以消毒。从这一点开始，所有操作应严格在生物安全柜内使用无菌条件进行。

3. 将细胞悬液转移到含有5ml预加热的完全生长培养基的15ml无菌圆锥管中。以125xg离心细胞5-7分钟。

4. 在不干扰细胞沉淀物的情况下吸去上清液。将细胞沉淀物重新悬浮在推荐的预加热的完全生长培养基中，并分装到T25培养瓶中。

5. 在推荐的条件下培养细胞。

传代协议：

下面给出的体积是针对T75培养瓶的；根据培养容器的大小按比例增加或减少体积。当培养容器80%融合时传代细胞。

1. 吸去培养基，并加入2-3ml预加热的0.25% Trypsin-EDTA到培养容器中。

2. 在显微镜下观察细胞以确认脱落（通常在2-10分钟内）。难以脱落的细胞可以放在37°C下，几分钟以促进脱落。

3. 通过向培养容器中加入相等体积的完全生长培养基来中和Trypsin-EDTA。

4. 将培养悬液转移到无菌离心管中，并以125xg离心5分钟。实际的离心时间和速度可能因细胞类型而异。

5. 吸去上清液，并用预加热的新鲜完全生长培养基重新悬浮沉淀物。根据需要将适量的细胞悬液添加到新的培养容器中。

6. 在推荐的条件下培养细胞。

永生化小鼠雪旺细胞文献参考：

Watabe, K., Fukuda, T., Tanaka, J., Honda, H., Toyohara, K., & Sakai, O. (1995). Spontaneously immortalized adult mouse Schwann cells secrete autocrine and paracrine growth-promoting activities. Journal of neuroscience research, 41(2), 279–290.