CellSafe/艾美捷HiSense cDNA合成主混合液：更高的产量、更好的纯度

HiSense? cDNA合成主混合液是一种全合一（All-in-one）格式的产品，它允许更方便、更快速地合成第一链cDNA。该主混合液含有M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆转录酶（RTase）、核糖核酸酶抑制剂、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）和Oligo（dT）引物。

Oligo (dT) 是能够与 mRNA 的 3'-Poly(A) 尾部退火的寡核苷酸。Oligo (dT) 的用途仅限于具有 3'-Poly(A) 尾部的 mRNA 或总 RNA 模板。

一般说明：

1) 富集的聚腺苷酸 (poly(A)+) mRNA 和总 RNA 都可用于第一链 cDNA 的合成，但富集的聚腺苷酸 mRNA 可能会产生更高的产量和最终产品更好的纯度。

2) RNA 样本必须无基因组 DNA 污染。

3) 为了去除与 cDNA 互补的 RNA，加入 1 ?l (2 U) 的大肠杆菌核糖核酸酶 H 并在 37°C 下孵育 20 分钟。

4) 第一链 cDNA 合成完成后，cDNA 产物可以直接作为模板用于标准 PCR/qPCR。

艾美捷CellSafe HiSense cDNA合成主混合液#CDS-100, CDS-200, CDS-400, CDSM-200, CDSM-400, LCDS-96, LCDS-480操作步骤：

1) 在冰上解冻 RNA 模板和全合一 5X cDNA 主混合液。轻轻但彻底地混合溶液。

2) 在冰上的 PCR 管中准备以下反应混合物。

3) 充分混合组分并通过简短的离心收集。在以下反应条件下孵化混合物。

4) 新合成的第一链 cDNA 已准备好用于立即的下游应用，或在 -20°C 下长期储存。

CellSafe HiSense cDNA合成主混合液 qPCR结果：

使用HiSense?QGreenBlue qPCR Master Mix（目录号QBLR-05）扩增人cDNA的GAPDH基因（217bp片段）

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