Assay Genie-PIVKA-II ELISA试剂盒（HUES03441）：高度特异性的人类PIVKA-II检测工具

本试剂盒采用夹心ELISA法。该试剂盒中提供的微量ELISA板已经用人PIVKA-II特异性抗体预包被。将标准品或样品加入适当的微量ELISA板孔中，并与特异性抗体结合。然后将对人PIVKA-II特异性的生物素化检测抗体和阿维丁-辣根过氧化物酶（HRP）缀合物依次加入每个微孔板中并孵育。游离成分被冲走。将基质溶液添加到每个孔中。只有那些含有人PIVKA-II、生物素化检测抗体和Avidin-HRP缀合物的孔才会呈现蓝色。通过加入停止溶液终止酶-底物反应，并且颜色变黄。光密度（OD）是在450 nm±2 nm的波长下用分光光度法测量的。OD值与人PIVKA-II的浓度成比例。可以通过将样品的OD与标准曲线进行比较来计算样品中人PIVKA-II的浓度。

典型数据：

由于标准曲线的吸光度（OD）值可能会根据实际检测操作的条件（例如操作员、移液技术、洗涤技术或温度效应）而变化，因此操作员应为每次测试建立一个标准曲线。下面提供的典型标准曲线和数据仅供参考。

作为Assay Genie全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Assay Genie热销产品PIVKA-II ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

PIVKA-II ELISA试剂盒：

产品编号：HUES03441

产品类型：酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒

规格：96次检测

灵敏度：0.09 ng/mL

检测范围：0.16-10 ng/mL

ELISA类型：夹心法

反应性：人类

样本类型：血清、血浆及其他生物体液

精确：

批内精度（批内精度）：在一块平板上分别对3个具有低、中、高水平人类PIVKA-II的样品进行20次测试。

批间精密度（两次测定之间的精密度）：在3个不同的平板上测试3个具有低、中程和高水平人类PIVKA-II的样品，每个平板20个重复。

试剂盒组成：

未开封的试剂盒可在4°C下保存1个月。如果试剂盒在1个月内未使用，收到试剂盒后，应根据以下条件分别存放物品。

程序：

设置标准品、测试样本和对照（零）孔在预包被板上，并记录它们的位置。建议对每个标准品和样本进行双重测量。注意：在添加所有溶液时，应将溶液滴加到板孔底部，避免与孔壁接触。确保在添加到孔中时溶液不会产生泡沫。

将100?l的标准溶液分装到标准孔中。

向对照（零）孔中加入100?l的样本/标准稀释缓冲液。

向测试样本孔中加入100?l适当稀释的样本（血清、血浆、组织匀浆和其他生物体液）。

使用试剂盒中提供的封口膜覆盖板，并在37°C下孵育90分钟。

吸去每个孔中的液体，不要洗涤。立即向每个孔中加入100?L的生物素标记检测抗体工作溶液。用板封膜覆盖板并轻轻混合。在37°C下孵育1小时。

吸去或倒掉板上的溶液，向每个孔中加入350?L的洗涤缓冲液，并在室温下孵育1-2分钟。吸去每个孔中的溶液，并把板子在吸水纸上拍打以干燥。重复这个过程3次。注意：在这一步和其他洗涤步骤中可以使用微孔板洗涤器。

向每个孔中加入100?L的辣根过氧化物酶（HRP）标记结合物工作溶液。用板封膜覆盖并在37°C下孵育30分钟。

吸去或倒掉每个孔中的溶液。按照第7步进行的洗涤过程重复五次。

向每个孔中加入90?L的底物试剂。用新的板封膜覆盖并在37°C下孵育大约15分钟。保护板子避免光线照射。注意：根据实际颜色变化，反应时间可以缩短或延长，但不要超过30分钟。

向每个孔中加入50 ?L的终止溶液。注意：添加终止溶液的顺序应与底物溶液的顺序相同。

立即使用设置为450 nm的微孔板读取器测定每个孔的光密度（OD值）。

Assay Genie旗下涵盖了15种种属的高品质的ELISA试剂盒及多种抗体，可检测的指标种类丰富，覆盖免疫、代谢和分子等多种研究领域，是科学研究中便捷的小助手。