Synaptic Systems：CD86在免疫突触中的表达方案

免疫突触（IS）可以定义为免疫细胞在与另一个细胞界面处分子的有序重组（Orange, 2008）。IS存在于抗原呈递细胞（APCs）或靶细胞与淋巴细胞如T细胞、B细胞或自然杀伤细胞之间。这种相互作用对于防御广泛的病原体和异常宿主细胞至关重要。这种相互作用的失调使宿主极易受到病原体的侵害或肿瘤逃逸，另一方面则可能导致自身免疫性疾病（Dustin, 2014）。IS和神经突触共享一些特性，如突触间隙、粘附分子、稳定性和极性，然而免疫细胞之间的相互作用是短暂的，持续时间从几分钟到几小时不等（Friedl et al., 2004）。

细胞类型特异性的免疫突触

根据所涉及的细胞类型，免疫突触可以分为三种功能亚型（Mastio et al., 2020）：溶解性免疫突触（细胞毒性免疫细胞与恶性细胞之间的界面）、抑制性突触（细胞毒性淋巴细胞与健康细胞之间的界面）和调节性突触（细胞毒性细胞与抗原呈递细胞之间的界面，例如树突状细胞）。因此，IS的形成具有许多不同的功能，如配体识别、信号放大和整合、共刺激、细胞毒性、蛋白质分泌和转移、细胞命运决定、激活抑制和信号终止（Orange, 2008年综述），这取决于参与IS形成的细胞类型和受体。

在感染弓形虫的小鼠肝脏中APCs的CD86表达增强

CD86（簇分化86，也称为B7.2）属于B7家族的免疫调节细胞表面蛋白配体，通常在静息B细胞、树突状细胞和巨噬细胞上表达水平较低。激活会导致CD86表达增强（Collins et al., 2005）。CD86和遗传上密切相关的CD80蛋白（也称为B7.1）由抗原呈递细胞表达，通过与T细胞上表达的CD28和细胞毒性T淋巴细胞抗原4（CTLA-4，CD152）相互作用，提供T细胞激活和耐受所需的共刺激信号。CD28的结合导致T细胞激活（Sansom et al. 2000），而CTLA-4的结合则减弱T细胞反应，并作为T细胞激活的负调节器。CD28超家族成员PD-1在与其配体PD-L1结合后也负向调节T细胞激活（Brunner-Weinzierl et al., 2018）。CD80和CD86在免疫调节中扮演非等价的角色：CD86是调节性T细胞（Tregs）增殖和生存的主要配体（Halliday et al., 2020）。与CD80相比，CD86在增强T细胞杀伤能力方面表现出非常高的效率（Thiel et al., 2010）。

弓形虫（Toxoplasma gondii）是一种细胞内原生动物寄生虫，它不仅感染大脑，还感染其他器官，特别是肝脏。肝脏感染的特点是单核炎症细胞的多灶性聚集（Fernández-Escobar et al., 2021）。在小鼠中，弓形虫感染已被证明可以上调CD86的表达，但不影响CD80在单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞中的表达（Fischer et al., 1999）。

使用免疫细胞标记物IBA-1、CD86、CD11b和Chil3对未感染对照小鼠和感染弓形虫的小鼠肝脏切片进行免疫组化染色，结果显示在感染弓形虫的小鼠肝脏中IBA1阳性巨噬细胞高度浸润，以及CD86+、CD11b+和Chil3+细胞的多灶性聚集。在未感染对照小鼠中，IBA-1主要染色Kupffer细胞，且很少检测到CD86阳性APCs。未感染肝脏中CD11b和Chil3阳性主要限制在少数CD11b+骨髓源性单核细胞或Chil3+骨髓源性中性粒细胞。

使用小鼠巨噬细胞标记物F4/80和CD11b对肝脏切片进行免疫荧光双重染色，结果显示在未感染和感染弓形虫的小鼠肝脏中均存在F4/80high CD11b-细胞。然而，F4/80low CD11b+细胞仅在感染弓形虫小鼠肝脏的单核细胞聚集中检测到。F4/80+ CD11b-染色识别Kupffer细胞，而F4/80low CD11b+染色特征为在炎症条件下招募的单核源性巨噬细胞（参见：小鼠驻留巨噬细胞）。

免疫荧光双重染色显示，在感染弓形虫的小鼠肝脏单核细胞聚集中，CD86表达主要在F4/80low或F4/80-细胞中增强，这些细胞被特征化为激活的抗原呈递细胞。

通过使用T细胞标记物CD3e（T细胞系标记物）、CD4（T辅助细胞）或CD8a（细胞毒性T细胞）对肝脏切片进行免疫组化染色，可以观察到CD4+ T辅助细胞和，较少程度上，CD8+细胞毒性T细胞大量浸润感染弓形虫的小鼠肝脏。

T细胞免疫已被证明对感染弓形虫的宿主存活至关重要。CD4+ T细胞对早期干扰素-γ的产生很重要。CD8+ T细胞被认为是对抗这种寄生虫的主要效应细胞（Casciotti, 2002）。对感染弓形虫的小鼠肝脏切片进行CD4和CD86的免疫荧光双重染色显示，CD4+ T辅助细胞在单核细胞聚集中与CD86阳性APCs密切接触，形成免疫突触。

T细胞与APCs接触点的超分子组织首次在1998年被可视化（Monks et al., 1998）。免疫突触的关键分子不仅在界面处被覆盖，而且被组织分布在界面的不同区域。这些区域被称为超分子活化复合物（SMACs）（Huppa et al., 2003年综述）。超分子活化复合物的中心区域（cSMAC）在T细胞位点富集T细胞受体（TCRs）和共刺激受体（CD28、CTLA-4），在APC位点富集肽-MHC（pMHC）和B7配体（CD86、CD80）。cSMAC被认为是信号终止和受体循环的位点（Verboogen et al., 2016）。细胞粘附分子如ICAM-1或粘附分子白细胞功能相关分子-1（LFA-1）位于c-SMAC周围的环状结构中，被称为外周SMAC（p-SMAC）。这些细胞粘附分子为免疫突触提供机械支架。大分子如CD43和CD45位于更远端的区域，称为dSMAC。在细胞毒性T细胞和NK细胞中发现的分泌突触中，溶菌颗粒的释放发生在cSMAC的另一个结构域：分泌结构域（Watanabe et al., 2018）。

艾美捷Synaptic Systems：CD86相关产品：

Cat. No. Product Description Application Quantity

HS-384 117   CD11b, rat, monoclonal, purified IgG mouse specific WB IHC IHC-P IHC-Fr   200 ?l

HS-413 108   CD3e, rabbit, monoclonal, recombinant IgG mouse specific  IHC IHC-P   100 ?l

HS-360 117   CD4, rat, monoclonal, purified IgG mouse specific   WB IHC IHC-P IHC-Fr  200 ?l

HS-466 003   CD86, rabbit, polyclonal, affinity purified  mouse specific  WB IHC IHC-P 50 ?g

HS-361 003   CD8a, rabbit, polyclonal, affinity purified  mouse specific  WB IHC IHC-P IHC-Fr  200 ?l

HS-442 017   Chil3 / YM1, rat, monoclonal, purified IgG mouse specific WB ICC IHC IHC-P  100 ?g

HS-397 008   F4/80, rabbit, monoclonal, recombinant IgG WB IHC IHC-P  100 ?l

HS-397 017   F4/80, rat, monoclonal, purified IgG   WB IHC IHC-P IHC-Fr  200 ?l

HS-234 017   IBA1, rat, monoclonal, purified IgG   WB ICC IHC IHC-P   200 ?l

Synaptic Systems：CD86部分文献：

Orange, 2008. Formation and function of the lytic NK-cell immunological synapse. PMID: 19172692

Collins et al., 2005. The B7 family of immune-regulatory ligands. PMID: 15960813

Dustin 2014. The immunological synapse. PMID: 25367977

Friedl et al., 2004. Diversity in immune-cell interactions: states and funtions of the immunological synapse.

PMID: 15450978

Mastio et al. 2020. Higher Incidence of B Cell Malignancies in Primary Immunodeficiencies: A Combination of Intrinsic Genomic Instability and Exocytosis Defects at the Immunological Synapse. PMID: 33240268