幽门螺杆菌IgM ELISA试剂盒检测程序说明

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）是一种螺旋形细菌，由B.J. Marshall在1982年从人体胃粘膜中培养出来。研究表明，幽门螺杆菌的存在与多种胃肠道疾病有关，包括胃炎、十二指肠和胃溃疡、非溃疡性消化不良以及胃腺癌和淋巴瘤。在十二指肠溃疡患者中，该细菌的存在率为95-98%，在胃溃疡患者中为60-90%。研究还表明，通过抗微生物治疗去除这种细菌与症状的缓解和疾病的治愈相关。

患有与胃肠道相关的临床症状的患者可以通过两种方法诊断幽门螺杆菌感染：(1) 侵入性技术 - 包括活检后进行培养或活检标本的组织学检查，或直接检测尿素酶活性。(2) 非侵入性技术 - 包括尿素呼气试验和血清学方法。所有在活检样本上进行的检测都可能受到采样误差和污染细菌干扰的影响。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测幽门螺杆菌特异性IgM抗体是血清学检测的首选技术，因为它的准确性和简单性。

Calbiotech幽门螺杆菌（H.pylori）IgM ELISA试剂盒用于检测人血清或血浆中幽门螺杆菌的IgMantibody。

艾美捷Calbiotech-幽门螺杆菌IgM ELISA试剂盒：

目录编号：HP015M

产品类型：酶联免疫吸附试验（ELISA）

数量：96次测试（12x8可拆卸条状孔板）

样本体积：每孔10微升

物种：人类

储存与稳定性：产品应储存在2-8摄氏度。

注意事项：仅供研究使用。不用于诊断程序。

幽门螺杆菌IgM ELISA试剂盒检测原理：

纯化的幽门螺杆菌抗原被包被在微孔板的表面。将稀释后的人体血清加入孔中，如果存在幽门螺杆菌IgM特异性抗体，它就会与抗原结合。所有未结合的物质都被洗去。然后加入酶结合物，它与抗体-抗原复合物结合。多余的酶结合物被洗掉，接着加入TMB试剂溶液。在特定的时间，酶结合物的催化反应被终止。产生的色度强度与样本中IgM特异性抗体的数量成正比。结果通过微孔板读取器读取，并与校准品和对照品平行比较。

幽门螺杆菌IgM ELISA试剂盒检测程序：

1. 在架上固定所需数量的包被孔。

2. 通过向样本稀释液中加入5 ?L的样本来准备测试样本、阴性对照、阳性对照和校准品的1:40稀释液。混合均匀。

3. 向相应的孔中分配100 ?L的稀释血清、校准品和对照品。对于试剂空白，在1A孔位置分配100 ?L的样本稀释液。轻敲架子以去除液体中的气泡，并混合10秒钟。

4. 在室温下孵育30分钟。

5. 在孵育期结束时，清除所有孔中的液体。用稀释的洗涤缓冲液（1×）冲洗并甩干微孔板4次，然后用蒸馏水冲洗1次。（请不要使用自来水。）

6. 向每个孔中分配100 ?L的酶结合物。轻轻混合10秒钟。

7. 在室温下孵育30分钟。

8. 清除所有孔中的酶结合物。用稀释的洗涤缓冲液（1×）冲洗并甩干微孔板4次，然后用蒸馏水冲洗1次。

9. 向每个孔中加入100 ?L的TMB试剂。轻轻混合10秒钟。

10. 在室温下孵育20分钟。

11. 向每个孔中加入100 ?L的终止溶液，包括2个空白孔。

12. 轻轻混合30秒钟。确保所有的蓝色完全变为黄色非常重要。

13. 在15分钟内使用微孔板读取器读取450 nm处的光密度。

注意：洗涤程序至关重要。洗涤不充分会导致颜色发展不当。

幽门螺杆菌IgM ELISA试剂盒文献参考：

1. Cutler AF; Prasad VM; Santogade P. Four-year trends in Helicobacter pylori IgG serology following successful eradication. Am J Med 1998;105(1):18-20  

2. Holtmann G; Talley NJ; Mitchell H; Hazell S. Antibody response to specific H. pylori antigens in functional dyspepsia, duodenal ulcer disease, and health. Am J Gastroenterol 1998; 93(8):1222-7.  

3. Parsonnet J; Replogle M; Yang S; Hiatt R. Seroprevalence of CagA-positive strains among Helicobacter pylori-infected, healthy young adults. J Infect Dis 1997;175(5):1240-2.  

4. Klaamas K; Held M; Wadstr¨om T; Lipping A; Kurtenkov O. IgG immune response to Helicobacter pylori antigens in patients with gastric cancer as defined by ELISA and immunoblotting. Int J Cancer 1996; 67(1):1-5.  

5. Matsukura N; Onda M; Tokunaga A; Kato S; Yoshiyuki T; Hasegawa H; Yamashita K; Tomtitchong P; Hayashi A. Role of Helicobacter pylori infection in perforation of peptic ulcer: an age- and gender-matched case-control study. J Clin Gastroenterol 1997;10:S235-9.  

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