幽门螺杆菌IgG ELISA试剂盒检测原理&测定程序

幽门螺杆菌菌株分为两大类——既表达VacA又表达CagA的菌株（I型）和既不表达VacA也不产生CagA（II型）的菌株。I型菌株在溃疡和癌症患者中占主导地位。高达50%的成年人感染了幽门螺杆菌，但他们中的大多数是渐进的，不会发展成溃疡。原因是他们感染了II型。80-100%的十二指肠溃疡患者产生针对128 kd抗原的CagA抗体，而仅患有胃炎的幽门螺杆菌感染者中这一比例为60-63%，这表明对128 kd蛋白的血清学反应在患有十二指肠溃疡的幽门螺杆杆菌感染者中比没有消化性溃疡的感染者更普遍。在发展为癌症的幽门螺杆菌感染患者中，CagA抗体的敏感性为94%，特异性为93%，表明检测CagA的抗体是诊断十二指肠溃疡和癌症的有用标志物。

Calbiotech幽门螺杆菌（H.pylori）IgG ELISA试剂盒用于检测人血清和血浆中针对H.pylori的IgG抗体。

艾美捷Calbiotech-幽门螺杆菌IgG ELISA试剂盒：

目录编号：HP013G

产品类型：酶联免疫吸附试验（ELISA）

数量：96次测试（12x8可拆卸条状孔板）

样本体积：每孔10微升

物种：人类

储存与稳定性：产品应储存在2-8摄氏度。

注意事项：仅供研究使用。不用于诊断程序。

Calbiotech-幽门螺杆菌IgG ELISA试剂盒检测原理：

将稀释的患者血清加入涂有纯化抗原的孔中。IgG特异性抗体（如果存在）会与抗原结合。将所有未结合的物质洗掉，加入酶偶联物以结合抗体-抗原复合物（如果存在）。将多余的酶偶联物洗掉，加入底物。培养板，使酶水解底物。产生的颜色强度与样品中IgG特异性抗体的量成正比。

测定程序：

将所有样本和试剂盒试剂放置至室温（20-25°C）并轻轻混合。

1. 将所需数量的包被条放入支架中。

2. 阴性对照、阳性对照和校准品已准备好使用。通过向200微升样品稀释液中加入10微升样本，制备1:21的样品稀释液。混合均匀。

3. 向相应的孔中分配100微升的稀释血清、校准品和对照品。对于试剂空白，向1A孔位置分配100微升样品稀释液。轻敲支架以去除液体中的气泡，并混合均匀。在室温下孵育20分钟。移除所有孔中的液体。用300微升的1X洗涤缓冲液冲洗孔三次。在吸水纸或纸巾上拍干。

4. 向每个孔中分配100微升的酶缀合物，并在室温下孵育20分钟。

5. 从所有孔中移除酶缀合物。用300微升的1X洗涤缓冲液冲洗孔三次。在吸水纸或纸巾上拍干。

6. 向每个孔中分配100微升的TMB底物，并在室温下孵育10分钟。加入100微升的终止液。

7. 在15分钟内使用ELISA读板仪读取450纳米处的吸光度。建议使用参考滤光片600-650纳米的双波长。

Calbiotech-幽门螺杆菌IgG ELISA试剂盒文献参考：

1. Cutler AF; Prasad VM; Santogade P. Four-year trends in Helicobacter pylori IgG serology following successful eradication. Am J Med 1998;105(1):18-20  

2. Holtmann G; Talley NJ; Mitchell H; Hazell S. Antibody response to specific H. pylori antigens in functional dyspepsia, duodenal ulcer disease, and health. Am J Gastroenterol 1998; 93(8):1222-7.  

3. Parsonnet J; Replogle M; Yang S; Hiatt R. Seroprevalence of CagA-positive strains among Helicobacter pylori-infected, healthy young adults. J Infect Dis 1997;175(5):1240-2.  

4. Klaamas K; Held M; Wadstr¨om T; Lipping A; Kurtenkov O. IgG immune response to Helicobacter pylori antigens in patients with gastric cancer as defined by ELISA and immunoblotting. Int J Cancer 1996; 67(1):1-5.  

5. Matsukura N; Onda M; Tokunaga A; Kato S; Yoshiyuki T; Hasegawa H; Yamashita K; Tomtitchong P; Hayashi A. Role of Helicobacter pylori infection in perforation of peptic ulcer: an age- and gender-matched case-control study. J Clin Gastroenterol 1997;10:S235-9.   

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