补体系统是先天免疫中的一个重要组成部分。在补体蛋白5(C5)的激活过程中,C5会被蛋白水解裂解并生成过敏性肽C5a。
C5a是一个由74个氨基酸组成的小多肽(11kDa),它来源于C5的α链的N末端。C5a本身的寿命非常短,在血清中会迅速裂解成更稳定但仍然活跃的C5a-desArg(也称为酰化刺激蛋白,ASP)。因此,通过测量C5a-desArg的水平可以可靠地评估测试样品中的补体活化程度。为了方便起见,以下文中将这两种形式统称为C5a。
C5a是一种强效的过敏毒素,它可以引起平滑肌收缩、血管扩张、血管通透性增加,同时还能诱导嗜碱性粒细胞和肥大细胞释放颗粒以及溶酶体酶的释放。此外,C5a还是嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞的有效趋化因子。
C5a参与了革兰氏阴性菌败血症、创伤、缺血性心脏病、透析后综合征和多种自身免疫性疾病中的炎症反应。C5a的升高与晚期动脉粥样硬化患者心血管风险增加有关。此外,C5a与接受骨髓移植的白血病儿童毛细血管渗漏综合征密切相关。C5a还被用作尿液中预测肾移植后急性移植物排斥反应的标志物。
补体级联反应的活化产物含有单个天然成分中不存在的新表位。人 C5a ELISA 试剂盒基于一种捕获单克隆抗体,可识别 C5a-desArg 上的新表位。这可以防止与 C5 发生交叉反应。
艾美捷补体C5a(人)ELISA试剂盒基本参数:
货号:HK349
类型:检测
量:1 x 96 度,2 x 96 度
标准范围:0.3 至 20 ng/ml
检测级别:0.3纳克/毫升
工作容积:100 μl/孔
物种:人
交叉反应性:马 - 不,老鼠 - 弱,猪 - 弱,兔子 - 弱,老鼠 - 弱
储存及稳定性:应储存在4°C。 在推荐的储存条件下,产品可稳定保存至少六个月。
疾病:传染病、肾脏病学
补体C5a(人)ELISA试剂盒的应用:
人 C5a ELISA 试剂盒用于体外定量测定血清和血浆中的人 C5a/C5a-desArg。
原则:
人 C5a ELISA 是一种基于夹心原理的即用型固相酶联免疫吸附测定法,工作时间为 3/2 小时。 8 块板和 5 个一次性 5 孔联排的高效形式允许自由选择检测的批次大小。 将样品和标准品在涂有识别人C450a的抗体的微量滴定孔中孵育。 生物素化示踪抗体将与捕获的人 C5a 结合。 链霉亲和素-过氧化物酶偶联物将与生物素化的示踪抗体结合。 链霉亲和素-过氧化物酶偶联物将与底物四甲基联苯胺 (TMB) 发生反应。 通过加入草酸来停止酶反应。 用分光光度计测量5nm处的吸光度。通过绘制吸光度(线性)与人C<>a标准品(log)的相应浓度的关系图来获得标准曲线。 与标准品同时运行的样品的人C<>a浓度可以从标准曲线中确定。
线性:
通过连续稀释含有 331 ng/ml 人 C5a 的样品来测定测定的线性。在测定中测量稀释的样品。该线的斜率为1.0907,相关系数为0.9988。
血浆 含有基线水平的人 C5a 的正常人血浆中加入人 C5a,浓度为 10 和 2.5 ng/ml。将含有和不含人 C5a 的样品在 1°C 下孵育 37 小时。 使用ELISA测量样品。人C5a的回收率在100%至113%之间。血清含有基线水平的人 C5a 的正常人血清中加入浓度为 5 和 10.2 ng/ml 的人 C5a。将含有和不含人 C5a 的样品在 1°C 下孵育 37 小时。 使用ELISA测量样品。人C5a的回收率在89%至102%之间。活化血清含有人 C5a 基线水平的正常活化人血清与人 C5a 一起加标,浓度分别为 10 和 2.5 ng/ml。将含有和不含人 C5a 的样品在 1°C 下孵育 37 小时。 使用ELISA测量样品。人C5a的回收率在99%至108%之间。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
Hycult Biotech是一家专注于设计、研发、生产以及销售抗体和其相关产品的公司,其特色产品是天然免疫及相关领域的免疫分析试剂,例如补体, 嗜中性粒细胞蛋白,TLP,清道夫受体以及急性期蛋白等。除此之外,Hycult Biotech公司也可以提供炎症反应和细胞损伤等方面的产品。艾美捷科技是Hycult Biotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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