基质胶凝胶制备方法及相关FAQ

类器官（organoids）是指一种利用干细胞、祖细胞等在体外培养出的3D细胞培养物并具有一定的空间结构组织类似物。2021年，类器官技术被列为“十四五”国家重点研发专项，作为疾病模型，相比于传统2D疾病模型，类器官在阐明疾病的发展、稳态性和发病机理等与体内环境更加接近，在多领域将发挥重要，诸如细胞治疗、药物研发、基因工程、免疫研究、组织再生等领域。基质胶作为类器官和3D培养的重要载体，在其中发挥着举足轻重的作用。

基质胶是从富含胞外基质蛋白EHS小鼠肿瘤中提取取的可溶性基底膜制备物，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等组成，还包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多种生长因子。在室温条件下，基质胶聚合形成具有生物学活性的三维基质，能模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化。

凝胶制备方法

1）基质胶融化后，用预冷的枪头混匀基质胶。

2）将需要使用的培养板置于冰上，然后将培养的细胞与基质胶混合，用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照150-200 μL/cm2生长面积的浓度加入基质胶制备3D培养使用的凝胶，详见下图。

3）在37℃放置30min，此时即可加入细胞培养液。

3D细胞及类器官培养过程：

艾美捷Biogradetech 低生长因子，基质胶（类器官，3D培养）详情：

中文名称：低生长因子，基质胶（类器官，3D培养）

英文名字：Basement Membrane Matrix, Growth Factor Reduced (For Organoid/3D cell culturing)

货号：A-MGL01-10mL

规格：10mL

形式：标准型基质胶4℃溶解后，呈透明流动液态状态；高浓度基质胶0℃溶解后，呈透明流动液态状态，4℃久置呈半凝胶状

保存建议：≤-20°C

基质胶FAQ：

1、拿到的基质有色差的变化（淡黄色到深红色）是什么原因？

对于含酚红的基质胶主要原因是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使基质胶分散均匀。

2、基质胶的操作要注意哪些事项？

所有操作需在无菌环境下进行，应使用预冷的器材以保证基质胶正常操作。

3、基质胶的如何分装冻存使用？

可将冻融后的基质胶分装在多个冻存管，冻存管需预冷，分装后迅速冷冻并保存，避免多次冻融。

Biogradetech研究领域：蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。