细胞转染是指将外源基因如DNA,RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程,细胞培养完成后需进行细胞转染,根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前,常用的细胞转染方法主要分为三类途径:物理介导(电穿孔法,基因枪法、显微注射法)、化学介导(脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物介导法)、生物介导(病毒介导转染、原生质体转染)。
细胞转染方法 | 细胞转染原理 | 主要特点 | 适用类型 |
阳离子脂质体转染法 | 带正电荷的脂质体靠静电作用和DNA 结合形成 DNA-脂质体复合物,然后通过细胞的内吞作用进入细胞 | ·操作简便 | 瞬时转染 |
DEAE-右旋糖苷法 | 带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸的磷酸基团形成带正电的复合物,复合物和带负电的细胞膜接触后而被细胞膜摄取 | ·有一定的毒性 | 瞬时转染 |
磷酸钙法 | 磷酸钙能够促进外源DNA和细胞的结合,磷酸钙-DNA复合物能够附着到细胞表面,并通过内吞作用进入细胞 | ·操作简单 | 瞬时转染 |
电穿孔法 | 高脉冲的电压破坏细胞膜,在细胞膜表面形成孔道,DNA通过孔道进入细胞 | ·适用性广,适用于质粒和几十kb的基因组片段 | 瞬时转染 |
显微注射法 | 利用显微操作系统和显微注射技术将 | ·整合率较高,适用于工程改造和转基因动物的建立 | 瞬时转染 |
逆转录病毒转染 | 通过病毒的膜蛋白和细胞表面的受体相互作用而进入细胞,利用宿主细胞酶自行转录复制合成DNA,并随机整合到细胞基因组中 | ·转染效率高,适用于难转染细胞转染利用病毒介导转染,外源基因整合较稳定 | 瞬时转染 |
随着分子生物学的发展,转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、经济。
作为NCBI推荐的基因克隆供应商,GeneCopoeia推出5款不同类型的转染试剂:
※ EndoFectin™ Max(基于脂质体转染原理的转染试剂)
产品特性
对比Lipofectamine® 2000,EndoFectin™ Max在多种哺乳动物细胞中具有更优良的转染效率,适用于多种细胞系的转染操作;
对比Lipofectamine® 3000,EndoFectin™ Max具有同等或更高的转染效率;
对比Lipofectamine® 2000,EndoFectin™ Max对siRNA和质粒均有更优良的转染效率;
细胞毒性低;
进行转染操作时,不需提前去除细胞培养液或血清;
进行转染操作后,不需清洗细胞或更换培养基;
适用于基因过表达、基因敲减、敲除的常规转染操作,亦适用于微孔板的高通量转染操作。
货号 | 名称 | 适用性 |
EndoFectin™ Max转染试剂 (1 mL) | 广泛适用于多种细胞 | |
EndoFectin™ Max转染试剂 (3 mL) |
※ CRISPR-Fectin™(CRISPR-Cas9核蛋白专用的转染试剂)
产品特性
专门用于Cas9蛋白和合成的sgRNA的转染实验;
与其它公司的同类型产品相比,具有更高的转染效率;
转染前无需提前去除细胞培养液或血清;
转染后无需更换培养基。
货号 | 名称 | 适用性 |
CRISPR-Fectin™ 转染试剂 (1 mL) | 优化的CRISPR-Cas9核蛋白专用的转染试剂。可与GeneHero™ Cas9蛋白配合使用 | |
CRISPR-Fectin™ 转染试剂 (3 mL) |
※ EndoFectin™ Expi293(为Expi293F悬浮细胞进行优化设计)
产品特性
特别为Expi293F悬浮细胞进行优化设计,配合Expi293F悬浮细胞使用,可提高实验效率;
与其它公司的同类型产品相比,在Expi293F悬浮细胞的转染效率更高;
进行转染操作时,不需提前去除细胞培养液或血清;
进行转染操作后,不需清洗细胞或更换培养基;
适用于基因过表达、基因敲减、敲除的常规转染操作,亦适用于微孔板的高通量转染操作
货号 | 名称 | 适用性 |
EndoFectin™ Expi293 转染试剂 (1 mL) | 专注转染悬浮细胞293F,转染效率极高 | |
EndoFectin™ Expi293 增强转染试剂盒 (1L 转染用量) | ||
EndoFectin™ Expi293 增强转染试剂盒 (10L 转染用量) |
※ EndoFectin™ HepG2(特别为常用细胞系HepG2进行优化设计)
产品特性
特别为常用细胞系HepG2进行优化设计,HepG2是一种通常情况下较难转染的细胞;
与Lipofectamine® 2000、Lipofectamine® 3000相比,对HepG2细胞有更高的转染效率;
在HepG2细胞的转染效果可与电转染方法媲美,方便您以更简便快捷的方式获得高转染效率;
对比Lipofectamine® 2000,对siRNA和质粒都有更高的转染效率;
进行转染操作时,不需提前去除细胞培养液或血清;
进行转染操作后,不需清洗细胞或更换培养基。
货号 | 名称 | 适用性 |
EndoFectin™ HepG2 转染试剂 (1 mL) | 为常用细胞系HepG2进行优化设计 | |
EndoFectin™ HepG2 转染试剂 (3 mL) |
※ EndoFectin™ Lenti(一种基于阳离子转染原理的、高效的转染试剂)
产品特性
转染293T细胞,可收获更高滴度的慢病毒
对比市场其它同类型产品,EndoFectin™ Lenti可为慢病毒包装操作带来更高的转染效率和更高的产物滴度(如下图)
货号 | 名称 | 适用性 |
EndoFectin™ Lenti转染试剂 (1 ml) | 转染293T细胞,可收获更高滴度的慢病毒 | |
EndoFectin™ Lenti转染试剂 (3 ml)) |
GeneCopoeia致力于为国内生命科学工作者提供一流的产品和及时周到的服务,通过丰富的基因、蛋白、抗体、分析试剂盒等产品线,加速您的研究进程。作为GeneCopoeia在中国的区域一级代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的GeneCopoeia产品以及客户订制化服务。
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