事实上,许多所谓的“安全”凝胶染料含有众所周知的染料,可以结合活细胞中的 DNA,具有细胞毒性作用。GelRed 和 GelGreen 是高度敏感的凝胶染色剂,由于不透细胞膜,因此设计为无毒和无致突变性,因此它们不能进入活细胞。
为了使 GelRed 和 GelGreen 安全,Biotium 的科学家使用了一个新颖但非常简单的概念:通过防止染料进入活细胞来降低基因毒性。我们相信,通过拒绝其与活细胞中的基因组 DNA 接触的机会,可以使 DNA 结合染料不致突变或基本上不致突变。因此,我们设计了 GelRed 和 GelGreen 的化学结构,使染料无法穿过细胞膜。Ames 测试证实 GelRed 和 GelGreen 在远高于其用于凝胶染色的工作浓度的浓度下是非诱变性的。此外,环境安全测试表明,GelRed 和 GelGreen 对水生生物无害且无毒。因此,GelRed 和 GelGreen 可以丢弃到下水道或扔进普通垃圾桶。
GelGreen、GelRed、SYBR Green I 和 EtBr 在 +1 移码沙门氏菌指示菌株 TA98 中的致突变性比较,其中存在 S9 组分。* 表示 EB 未在此浓度下进行测试。# 表示 SYBR Green I 在此浓度下有毒。
GelRed 和 GelGreen 作为预制凝胶染色剂或凝胶后染色剂都非常敏感。GelRed 比 EtBr 敏感得多,并且与 SYBR Gold 不同,GelRed 还可以用作高度敏感的预制凝胶染料。GelRed 也可用作方便的预染上样缓冲液。GelGreen 的光谱与 SYBR Safe 相似,但灵敏度更高,可与 DarkReader 等蓝光凝胶成像系统一起使用。PAGE GelRed 专为丙烯酰胺凝胶中的 DNA 染色而设计。GelRed 和 GelGreen DNA 染料的另一个主要优势是它们卓越的稳定性。您可以像处理 EtBr 一样存储和处理这两种核酸染色染料。为方便起见,GelRed 和 GelGreen 也提供预包被的琼脂糖形式。
艾美捷GelRed&GelGreen核酸染料特征:
比 EtBr、SYBR Safe 和其他产品更灵敏
用于预制或后染色
兼容下游克隆和测序
GelRed 提供 6X 上样缓冲液形式
用于丙烯酰胺凝胶的 PAGE GelRed
GelRed:使用紫外透照仪和 EtBr 过滤器
GelGreen:使用 UV 或蓝色 LED 和 SYBR 过滤器,或我们的新型 Gel-Bright? LED 照明器
为您的应用选择合适的染色剂:
产品/方法 程序 好处 缺点 推荐给
使用GelRed Prestain Plus 6X DNA Loading Dye进行 DNA 预染色 GelRed 加载缓冲液在加载前直接添加到 DNA 样本中 ? 快速简单:一步上样和 DNA 染色
? 染料浓度较低,操作更安全
? 可以重新运行凝胶以使用空泳道
? 不推荐用于 PAGE、DGGE、EMSA 或 PFGE 凝胶
? 上样大量 DNA(超过 ~100 ng/条带)或某些限制性消化时,染料可能会导致条带迁移问题
? 常规琼脂糖凝胶
? 建议加载 50-200 ng ladder 或 2-5 uL PCR 产物(~100 ng/条带或更少)
使用GelRed 10,000X 水溶液或GelGreen 10,000X 水溶液进行预制染色
GelRed 或 GelGreen 在凝胶浇铸前与熔化的琼脂糖混合 熟悉的协议,快速的结果
使用GelRed Agarose LE或GelGreen Agarose LE进行预制染色
提供的琼脂糖预涂有 GelRed 或 GelGreen,只需溶解、加热和倾倒 更安全更方便,无需处理浓缩染料
使用GelRed 10,000X 水溶液或GelGreen 10,000X 水溶液
或 – GelRed 3X 水溶液进行电泳后染色
凝胶中不添加荧光染料,电泳后在 3X GelRed 或 3X GelGreen 溶液中染色
? 最准确的大小/最清晰的条带
? 染色溶液可重复使用
? 通过添加 NaCl 提高灵敏度 电泳后额外的染色步骤(最多 30 分钟)(一些客户报告说如果染料不重复使用,仅 5 分钟后结果良好)
? 高度准确的条带大小
? 凝胶中每条带含有超过 ~100 ng DNA
? 分析限制性酶切
使用PAGE GelRed 10,000X 或 1X 水溶液对 PAGE 凝胶进行电泳后染色 凝胶中不添加荧光染料,电泳后在1X PAGE GelRed溶液中染色
? 专为聚丙烯酰胺凝胶的高效渗透和染色而设计
? 与经典的 GelRed 一样,安全且环保 大约额外的染色步骤。电泳后30分钟 PAGE 凝胶中的核酸染色
Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen,以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。
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