支原体PCR检测试剂盒具有很高的特异性和敏感性,可Z大程度地减少假阳性,同时确保覆盖200多种支原体菌株,以便在1小时内快速可靠地常规筛选细胞培养物。支原体是非常不受欢迎的,容易获得并且因难以捉摸的感染发作而臭名昭著。它可以在分子水平上改变感染的细胞,导致细胞形态和生长特征的明显变化。建议及时检测细胞培养物中的支原体,以阻止广泛的污染并节省昂贵的消除工作。MasterMix含有凝胶上样染料,便于凝胶电泳上样。
支原体检测试剂盒组分:
产品组分 数量
BlasTaq? 2X PCR MasterMix 1.25 毫升
引物混合物 100 微升
阳性对照 250 微升
无核酸酶H2O 1.0 毫升
艾美捷支原体检测试剂盒(ABS-G238)方案:
1.在筛选前,细胞应在培养中至少保持48-72小时不受干扰,并且至少达到80%的密度。直接从培养中收集2.5微升。
2.使用前混合各个组分,并在冰上组装反应。
3.轻轻混合反应物并短暂离心。按照标准PCR的热循环条件进行操作:
4.进行PCR后,将反应体系保持在4°C,或存储在-20°C直至使用。
5.通过琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物。
6.通过乙酰胺或SafeView?(产品编号G108)染色进行可视化观察。
一般说明:
PCR产物大约500碱基对(bp)的长度表明所测试的细胞培养受到了支原体的污染。请注意,PCR产物的长度会根据不同的支原体菌株在370-550碱基对之间变化。
在进行PCR之前,应将反应混合物保持在冰上,并在反应混合物准备好后立即开始PCR。
为什么要检测细胞中的支原体?
由于支原体的体积很小,它可能存在于你的生长培养基中而无法被肉眼检测到。这可能会由于其对以下方面的影响而导致实验中出现重大错误:增殖、新陈代谢、基因合成与处理、粘附特性等等。
Applied Biological Materials Inc(abm)公司是加拿大一家不断寻找用于生命科学研究和药物开发新产品的公司。众多的产品线全面涵盖了许多J端技术,主要包括RT-PCR,RNA干扰的分子试剂,细胞永生化,腺病毒和慢病毒表达系统等。
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