Cytoskeleton G-Actin：F-Actin 体内分析试剂盒的多种用途

确定细胞群中丝状肌动蛋白 （F-肌动蛋白） 含量与游离球状肌动蛋白 （G-肌动蛋白） 含量的最可重复和最准确的方法是使用 F-肌动蛋白和 G-肌动蛋白细胞组分的蛋白质印迹定量 （1-4）。一般方法是在F-肌动蛋白稳定缓冲液中匀浆细胞，然后离心以将F-肌动蛋白从G-肌动蛋白池中分离出来。然后用SDS-PAGE分离馏分，并通过蛋白质印迹定量肌动蛋白。最终结果给出了确定细胞骨架中掺入的F-肌动蛋白与细胞质中发现的G-肌动蛋白比例的最准确方法。该试剂盒包含执行该测定所需的所有试剂。  

作为Cytoskeleton全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cytoskeleton热销产品G-Actin：F-Actin 体内分析试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。   

Cytoskeleton公司目前主要的产品有340余种，其产品主要覆盖肌动蛋白，微管蛋白，马达蛋白，小G蛋白，细胞外基质，活细胞成像等相关领域，提供对应的蛋白质，抗体，检测与分析试剂盒，并且产品线还在不断的扩大中。

G-Actin：F-Actin 体内分析试剂盒用途：

研究药物化合物对G-肌动蛋白与F-肌动蛋白比例的影响。 

研究突变细胞系与其亲本细胞系对G-肌动蛋白与F-肌动蛋白比例变化的影响。 

研究环境的物理改变对G-肌动蛋白与F-肌动蛋白比例的影响。

G-Actin：F-Actin 体内分析试剂盒内容：该试剂盒包含足够的材料，可用于 30-100 次检测，具体取决于检测设置，并包括用于阳性和阴性对照的试剂。包括以下组件： 

裂解和F-肌动蛋白稳定缓冲液 ATP （货号 # BSA04) 

蛋白酶抑制剂混合物（货号 # PIC02) 

F-肌动蛋白增强对照溶液 

F-肌动蛋白解聚对照溶液 对照 

G-肌动蛋白标准品（货号 # AKL99) 

抗肌动蛋白单克隆抗体（克隆 7A8.2.1）（货号 # AAN02-S) 

SDS 样品缓冲液 （5 x） 二甲基亚胺 

包含详细协议和广泛故障排除指南的手册

G-Actin：F-Actin 体内分析试剂盒示例结果：

在3°C/3%CO 50下，瑞士10T37细胞在DMEM / 5%FBS中生长至2%汇合度。 细胞未经处理（泳道1P和1S）或用0.1μM肌动蛋白聚合药物茉莉内酯在30°C / 37%CO 5（泳道2P和2S）下处理2分钟。将细胞裂解并加工成上清液（S）和沉淀（P）级分，并根据G-肌动蛋白/F-肌动蛋白体内检测试剂盒说明通过蛋白质印迹定量进行分析。

图1：在未经处理的瑞士3T3细胞中，45%的肌动蛋白是可溶性G-肌动蛋白（1S），55%是不溶性F-肌动蛋白（1P）。这与已发表的数据一致（3）。图2：在用肌动蛋白聚合药物茉莉内酯处理的瑞士3T3细胞中，只有5%的肌动蛋白保留在不溶性G-肌动蛋白部分（2S）中，而95%存在于不溶性F-肌动蛋白颗粒部分（2P）中。泳道 50、20 和 10 代表 G-肌动蛋白标准的 50ng、20ng 和 10 ng。M代表分子量标志物（分子量显示在印迹的右侧）。   

引文： 

Milligan R.A. et al. 1990. Molecular structure of F-actin and location of surface binding sites. Nature 348, 217-221. 

Dos Remedios C.G. et al. 2003. Actin binding proteins: regulation of cytoskeletal microfilaments. Physiol. Rev. 83, 433-473. 

Phillips D.R. et al. 1980. Identification of membrane proteins mediating the interaction of human platelets. J. Cell Biol. 86, 77-86. Kim H.R. et al. 2008. 

Cytoskeletal remodeling in differentiated vascular smooth muscle is actin isoform dependent and stimulus dependent. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 295, C768-C778. 

Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。