想同时进行多细胞因子检测，你只需要一个“复联”FluoroSpot

【Mabtech明星产品之前情回顾】：

1、计数分泌人干扰素-γ细胞的方案：人IFN-γ的ELISpot试剂盒，点击了解

2、你所不知道的Mabtech干扰素-γ抗体“大全”，点击了解

3、Mabtech干扰素-γ的ELISA试剂盒“集锦”，点击了解

4、计数分泌IFN-γ细胞的方案：Mabtech干扰素-γ的ELISpot试剂盒，点击了解

时空交织，瞬息万变。在灭霸的平衡大法下，复仇者联盟整支队伍损失了超过一半的英雄；仅剩钢铁侠、美国队长、雷神、黑寡妇、绿巨人、鹰眼这6位暂且存活了下来。

灭霸，泰坦星人，掌握宇宙强权，一个响指即可灭掉一半宇宙生命的霸主。他们，迎来了终局之战——协助我们进行多细胞因子检测。

来一波《复联4》，勾出满满的回忆杀~~~

“超级英雄”就像我们常规的酶联免疫斑点法（ELISpot）实验一样，每个实验孔只能检测一种细胞因子。而形成“复联”荧光免疫斑点法（FluoroSpot），就可以实现在一个孔内同时检测两种或两种以上的细胞因子或抗体。FluoroSpot是在ELISpot基础上发展起来的新方法，拥有ELISpot的灵敏度，采用荧光法，能够同时分析几种分泌物。

FluoroSpot优势：     

一：灵敏度高，操作简便，相对稳定，应用范围广等优点。

二：能够生成更多的数据，节省时间。与免疫斑点相比，使用的细胞和抗原均较少。

FluoroSpot 原理：     

三明治夹心结构在荧光斑点中得以应用，不同特异性的单克隆捕获抗体混合物被包被于96孔板的PVDF膜上，生物素标记的检测抗体识别一种分泌物，tag标记的检测抗体识别其它的分泌物来实现双色或三色细胞因子分泌细胞的检测。通过带有特定荧光基团的共轭试剂放大信号斑点来检测，可用自动读板器进行分析。

三色FluoroSpot分析结果图总共可以显示7个亚群：3个单色的细胞因子，3个双色的细胞因子，1个三色的细胞群。图像显示的是一个三色FluoroSpot分析结果。用一组CEF肽刺激人的外周血单个核细胞（PBMC），分别用FITC标记IFN-γ、CY3标记IL-10和CY5标记颗粒酶B（GzB）。Overylay展示的是三个指标叠加后得到的结果。

三色FluoroSpot分析：能够更容易区分不同的细胞因子

Mabtech的FluoroSpot试剂盒用途：     

1.用于分析T细胞响应，B细胞响应和分析巨噬细胞，单核细胞和树突状细胞，根据细胞因子不同的分布描绘不同的亚群。

2.三明治夹心法结合荧光基团标记的检测试剂能够对同一个孔中两个或两个以上的分析物进行分析。

3.对于某些分析物组合，提供带预涂板的试剂盒。预涂板是一种方便的选择，可以实现更快速的分析，同时将可变性降至最低。

艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐Mabtech品牌的FluoroSpot“战斗装备”，适用多种种属，产品优质，发表多篇高分文章。以下列举出部分的FluoroSpot试剂盒，供您参考。

PS：以上仅列出部分产品，此外Mabtech还提供10个板子的大规格包装的FluoroSpot试剂盒。

FluoroSpot试剂盒的特点和优势：

1、非常适合需要方便灵敏检测的用户。

2、设计用于计数分泌多种分析物的细胞。

3、适用人、猴、小鼠、牛、羊等多种种属的试剂盒可供选择。

4、包含不同组分的多样化试剂盒可供客户选择。

5、含预包被板的试剂盒可实现更快速的分析，同时将可变性降至最低。

常见疑难问题解答：

哪种细胞类型适合FluoroSpot分析？

FluoroSpot测定基本上可以应用于任何想要研究单细胞水平的蛋白质分泌的细胞。尽管到目前为止该技术主要用于鉴定抗原活化的T细胞分泌细胞因子和B细胞分泌抗体，但可以分析非粘附细胞和粘附细胞。

冷冻细胞可以用于FluoroSpot吗？

冷冻保存的细胞非常适合FluoroSpot。但是细胞的状态对实验结果有很大影响，必须规范冻存/复苏程序以获得高活力的细胞。

完成实验操作后需多长时间读取FluoroSpot板，即荧光基团的稳定性如何？

如果板保持干燥并且在黑暗中，荧光非常稳定，在分析前允许将板保存较长的时间（即几个月）。但是，为了获得最佳结果，我们建议在操作完成后一周内对板进行分析。

分析FluoroSpot板需要什么类型的分析仪？

FluoroSpot需要分析仪来显示荧光斑点，因为眼睛无法观察到斑点。我们建议使用配备滤光片的自动化系统：激发光（ex）490 nm /发射光（em）510 nm（FITC），ex 550 nm / em 570 nm（Cy3），ex 640 nm / em 660 nm（Cy5）和四色分析也包括ex 380 nm / em 430 nm（DAPI）。滤波片应对特定波长具有选择性，以避免渗透。为了正确测量多分泌细胞，分析仪需要能够创建叠加分析。

更多Mabtech的FluoroSpot试剂盒产品，欢迎垂询艾美捷科技~

高分文章参考：

1.Memory B Cells Activate Brain-Homing, Autoreactive CD4+ T Cells in Multiple Sclerosis. Cell. 2018.  

2.Respiratory Syncytial Virus Infects Regulatory B Cells in Human Neonates via Chemokine Receptor CX3CR1 and Promotes Lung Disease Severity.Immunity.2017.  

3.Microbiota epitope similarity either dampens or enhances the immunogenicity of disease-associated antigenic epitopes.PLoS One. 2018.  

4.Comparison of ELISpot and FluoroSpot in the Analysis of Swine Flu-Specific IgG and IgA Secretion by in Vivo Activated Human B Cells. Cells. 2012.  

5.Immunogenicity of synthetic peptide constructs based on PvMSP9E795-A808, a linear B-cell epitope of the P. vivax Merozoite Surface Protein-9. Vaccine. 2019.

Mabtech公司于1986年创办于瑞典，是一家欧洲的集研究，开发，销售，技术支持为一体的高科技免疫生物技术公司。Mabtech公司始终专业致力于研发新的单克隆抗体，生产创新的免疫试剂和销售高品质的全配套的免疫试剂盒。公司核心业务是致力于优化发展酶联免疫斑点法技术 (ELISpot)、荧光免疫斑点法技术 (FluoroSpot) 和酶联免疫吸附试验技术 (ELISA) 等免疫学方法。公司开发和生产多种针对细胞因子，免疫球蛋白和载脂蛋白的单克隆抗体，用于生命科学研究中的体外应用。Mabtech的试剂盒可用于研究感染性疾病，癌症，过敏，移植等免疫反应，通常用作疫苗试验中的监测工具。此外，还生产用于兽医和心血管研究的试剂盒。

艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商保持着密切的合作关系，目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理，主要包括：Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等，可以在第一时间为用户提供最前沿的专业资讯、完备的产品及物流服务。

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