纤连蛋白从牛血浆中纯化。蛋白质纯度通过在4-20%聚丙烯酰胺凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白质的密度测定来确定。HiLyte Fluor 488标记的纤连蛋白纯度为>80%(图1)。
该蛋白被修饰以含有随机表面赖氨酸共价连接的HiLyte Fluor 488(2)。荧光染料的活化酯用于标记蛋白质。标记化学计量是通过蛋白质和染料浓度的光谱测量来确定的。最终标记化学计量是每个蛋白质分子 1-3 种染料(图 2)。
HiLyte Fluor 488标记的纤连蛋白可以使用350-450nm激发和500-550nm发射的滤光片组进行检测。 纤连蛋白在SDS-PAGE上作为单个亚基运行,表观分子量为230 kDa。FNR02以橙色冻干粉的形式提供。每瓶FNR02含有20μg蛋白质。
作为Cytoskeleton全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cytoskeleton热销产品纤维连接蛋白 HiLyte488 (牛血浆)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
Cytoskeleton公司目前主要的产品有340余种,其产品主要覆盖肌动蛋白,微管蛋白,马达蛋白,小G蛋白,细胞外基质,活细胞成像等相关领域,提供对应的蛋白质,抗体,检测与分析试剂盒,并且产品线还在不断的扩大中。
产品名称 | 货号 | 详情 |
纤维连接蛋白 HiLyte488 (牛血浆) | FNR02-A | 查看 |
纤维连接蛋白 HiLyte488 (牛血浆)用途包括:
观察纤连蛋白基质组装和细胞粘附
细胞侵袭检测 (1)
FACS 分析
纯度纯度 纯度
是通过SDS-PAGE凝胶上蛋白质的扫描密度测定法确定的。样品纯度为>80%。
HiLyte Fluor 488 标记的纤连蛋白纯度测定(图1)
HiLyte荧光 488标记的纤连蛋白在溶液中的吸收扫描(图2)
图1:在20-1%SDS-PAGE系统中通过电泳分离20 μg未标记的纤连蛋白(泳道488)和2 μgHiLyte Fluor 4标记的纤连蛋白(泳道20)。未标记的蛋白质用考马斯蓝染色并在白光下可视化。HiLyte Fluor 488标记的蛋白质在紫外光下可视化,染料前沿未观察到游离染料。使用精密红色蛋白质测定试剂(货号#ADV02)测定蛋白质定量。Mark12分子量标记物来自Invitrogen |
图2:用Milli-Q水稀释FNR02,并在250至650nm之间扫描其吸光度光谱。HiLyte Fluor 488标记化学计量法计算为每纤连蛋白1-3种染料,使用527nm处的吸光度最大值和比尔-朗伯定律。蛋白质结合时的染料消光系数为70,000M-1厘米-1 |
文献引用:
Artym VV. Et al. 2009. ECM degradation assay for analyzing local cell invasion. Methods in molecular biology, Extracellular matrix protocols, vol. 522: 211-219.Humana Press.
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