Advanced BioMatrix-ECM Select 阵列套件Ultra-36解决方案

ECM Select Array Kit Ultra-36是一种细胞外基质筛选阵列，包含一片功能化了专有水凝胶的显微镜玻璃载玻片。36种细胞外基质（ECM）条件被印刷成阵列点位，全部来自人源。每个点位直径为400微米，以9个复制品的形式印刷（图1）。ECM被局限在每个点位内，不与相邻点位交叉扩散，因此每个点位代表一个独立的“孔”或实验。哺乳动物细胞在体内存在着影响其行为（增殖、分化、死亡等）和功能的独特微环境。在体外培养细胞时，必须重现这种微环境以实现生理相关的生长。在影响细胞在体内行为的众多因素中，细胞外基质（ECM）在确定细胞功能方面起着重要作用。目前，寻找适用于细胞培养的合适ECM是一个试错过程，需要大量的细胞以及显著的时间和成本投入。ECM Select Array Kit Ultra-36允许以较少的细胞数量在短时间内并行筛选36种ECM和ECM组合。感兴趣的细胞被接种到带有4个培养腔的载玻片上（附带提供），并在孵育箱中培养所需的时间。可以使用亮场显微镜观察细胞形态、附着和生长。通过使用特定荧光标记物对载玻片上的细胞进行染色，可以监测特定的细胞行为。荧光信号可以通过荧光显微镜成像系统进行检测。

与在多孔组织培养板中执行相同实验相比，艾美捷Advanced BioMatrix ECM Select Array Kit Ultra-36使用简单。细胞接种、固定、洗涤和处理步骤都在一个单一的溶液交换中完成，消除了多孔板处理的步骤。对于大多数细胞类型，从开始到结束，确定适用于培养细胞的合适ECM可以在不到24小时内完成。

ECM Select 阵列套件 Ultra-36参数说明：

注意事项和免责声明：本品仅供研究和开发使用，不适用于人体或其他用途。

存储、保质期和稳定性ECM Select Ultra Array Kit的保质期在-10至-30°C下至少为12个月。保质期测试正在进行中。不建议重复冻结和解冻，但有限的冻结和解冻似乎对产品没有负面影响。不建议在更低的温度下存储。

根据我们的稳定性研究，ECM Select Ultra Array Kit在2至8°C下储存3-4天时表现良好。然而，经过2周在2至8°C下储存后，一些细胞外基质条件的细胞附着能力会降低。在2至8°C下储存1个月后，载玻片上几乎所有的ECM条件都失去了细胞附着能力。

操作步骤将细胞接种到载玻片上：

1. 准备250,000个所需的细胞，用5毫升完整的培养基（细胞密度为50,000个细胞/毫升）。

2. 从-20°C的冷冻机中取出ECM Select Ultra Array Kit，放在无菌层流罩下。打开铝箔袋，取出铝箔袋中的内容。首先，将培养皿从塑料袋中取出并取下盖子。然后打开载玻片架上的盖子，轻轻将载玻片从载玻片架上取下。将载玻片放入培养皿的一个腔中。在取下载玻片时要小心，使用无菌技术，如戴无菌手套或使用无菌镊子，并且只触摸载玻片的边缘。确保印刷的斑点面朝上（载玻片上的数字和字母应清晰可见）。

3. 在载玻片上加入5毫升无菌磷酸盐缓冲液（PBS）。确保整个载玻片浸没在PBS溶液中，并避免在载玻片下方困住气泡。轻轻摇晃载玻片几次，然后吸去PBS溶液。不要触摸载玻片表面。

4. 加入5毫升所需的培养基（与培养细胞相同的培养基），确保整个载玻片浸没在培养基中。轻轻摇晃载玻片几次，然后吸去培养基溶液。不要触摸载玻片表面。

5. 轻轻振动移液器，简短地将准备好的250,000个细胞上下吸取，并立即将细胞直接加到载玻片上。在分配细胞时，通过来回移动移液器来均匀分布细胞。不要触摸载玻片表面。将盖子盖回培养皿上。

6. 小心地将含有载玻片的4孔培养皿转移到孵育箱中，在37°C、5% CO2下培养细胞过夜（最少12小时以确保高效的细胞附着，最多3天）。

注意事项：当从载玻片架上取下载玻片时，载玻片表面可能可见阵列斑点。用PBS/培养基洗涤后，这些斑点可能会消失。这是正常的，不会影响ECM阵列的性能。

注意事项：对于细胞系，12小时应足够观察到细胞附着。对于从组织中新鲜分离的细胞或之前冻存的细胞，可能需要多达2天才能观察到显著的细胞附着。

注意事项：如果需要进行细胞增殖研究，请减少细胞数量，以便在斑点上留出额外的空间供细胞分裂。建议根据细胞的大小和形态，从100,000-150,000个细胞开始。细胞越大，所需细胞数量越少。

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。