Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸

Digoxigenin-11-dUTP被酶促掺入DNA/cDNA中作为其天然对应物dTTP的替代物。随后使用与辣根过氧化物酶（HRP），碱性磷酸酶（AP）或荧光染料缀合的洋地黄毒苷抗体检测所得的洋地黄毒苷标记的DNA/cDNA探针。通过连接到尿苷C5位的a11原子接头确保了最佳的底物性质和标记效率。推荐用于PCR和切口翻译的洋地黄毒苷-11-dUTP/dTTP比率：35%洋地黄毒苷-11-dUTP/65%dTTP

请注意：洋地黄毒苷-11-dUTP的最佳终浓度可能很大程度上取决于应用和测定条件。为了获得最佳的产品收率和高掺入率，建议对洋地黄毒苷-11-dUTP/dTTP比率进行单独优化。

Digoxigenin-11-dUTP结构式

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚（NU-803-DIGXS）：

运输：通过凝胶包进行运输。

存储条件：应在-20°C的环境下保存。

短期（累计最多1周）暴露于室温下是可行的。

保质期：自交货之日起12个月。

分子式：C43H65N4O21P3（自由酸形式）。

分子量：1066.91克/摩尔（自由酸形式）。

精确质量：1066.34克/摩尔（自由酸形式）。

纯度：高于或等于95%（通过高效液相色谱法测定）。

形态：在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液，分子量截留30 kDa。

颜色：无色至淡黄色。

浓度：1.0 mM至1.1 mM。

pH值：7.5，误差范围±0.5。

光谱特性：zui大吸收波长λmax为290纳米，摩尔吸光系数ε为8.8 L·摩尔^-1·厘米^-1（Tris-HCl，pH 7.5）。

应用：

生物素-11-dUTP可以通过以下方法嵌入到DNA或cDNA中：

使用Taq聚合酶进行聚合酶链式反应（PCR）。

利用DNA酶I/DNA聚合酶I进行缺口翻译（Nick Translation）。

使用Klenow exo-进行引物延伸（Primer Extension）。

使用末端脱氧核苷酸转移酶（Terminal deoxynucleotidyl Transferase，简称TdT）进行3'端标记。

使用MMLV逆转录酶进行逆转录。

此外，生物素-11-dUTP还可以通过以下方法嵌入到RNA中：

使用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）进行3'-端标记。

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚参考文献：

[1] Anderson et al. (2005) Incorporation of reporter-labeled nucleotides by DNApolymerases. Biotechniques 38:257.

[2] Jackson et. al (1991) Detection of Shiga Toxin-Producing Shigelladysenteriae Type 1 and Escherichia coli by Using Polymerase Chain Reactionwith Incorporation of Digoxigenin-11-dUTP. J Clin Microbiol. 29 (9):1910.

[3] Dauwerse et al. (1999) Two-colour FISH detection of the inv (16) ininterphase nuclei of patients with acute myeloid leukemia. Br J Haematol106:111.

[4] Wiegant et al. (2008) Probe Labeling and Fluorescence In Situ Hybridization.Current Protocols in Cytometry: Unit 8.3.

[5] Schmitz et al. (2008) Nonradioactive labeling of oligonucleotides in vitrowith the hapten digoxigenin by tailing with terminal transferase. Anal Biochem199:222.

[6] Grimmond et al. (2001) Expression Profiling with cDNA Microarray’s: A User’sPerspective and Guide. In: DNA Microarrays: Gene Expression Applications(Jordan). Springer Verlag Berlin Heidelberg

[7] Rosemeyer et al. (1995) Nonradioactive 3’-end-labeling of RNA molecules ofdifferent lengths by terminal deoxynucleotidyltransferase Anal Biochem224:446.

Digoxigenin-11-dUTP，地高辛/二硝基苯酚相关产品：

HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX

Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX