硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit测定程序&结果计算方案

硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）是肾上腺的一种更具体的产品，这种类固醇的测量在临床实践中具有广泛的意义。DHEA-S血浆检测的临床重要性与肾上腺增生的诊断和多毛症的鉴别诊断有关。

艾美捷Calbiotech-硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit：

目录编号：DH291S

产品类型：酶联免疫吸附试验（ELISA）

数量：96次测试（12x8可拆卸条状孔板）

标准范围：0.1-10 微克/毫升

分析灵敏度：0.1 微克/毫升

样本体积：每孔10 微升

物种：人类

储存与稳定性：产品应储存在2-8摄氏度。

注意事项：仅供研究使用。不用于诊断程序。

Calbiotech-硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit检测原理：

CBI DHEA-S试剂盒基于测试样本中的DHAEA-S与HRP偶联的DHEA-S之间竞争性结合的原理，以获得恒定量的抗DHEA-S抗体。在第一次孵育中，山羊抗兔IgG涂层孔与10μl DHEA标准品、患者样本、50μl DHEA-S酶（HRP）试剂和50μl抗DHEA抗体试剂在室温下孵育60分钟。在孵育过程中，HRP标记的DHEA-S与标准品和样品中的内源性DHEA-S竞争固定数量的DHEA-S抗体结合位点，同时抗DHEA Santibody与固定的二抗结合。因此，随着样本中DHEA-S浓度的增加，与孔免疫结合的DHEA-S HRP偶联物的量逐渐减少。然后去除未结合的DHEA-S-HRP缀合物并洗涤细胞。接下来，加入TMB试剂并在室温下孵育30分钟，从而产生蓝色。加入停止溶液停止显色，在450nm处用分光光度法测量吸光度。绘制颜色强度与DHEA-S浓度的标准曲线。

测定程序：

使用前，所有试剂和样本必须放置至室温。

1. 将所需数量的包被条固定在支架中。

2. 使用新的一次性吸头，向相应的孔中分配10微升的标准品、对照品和样品。

3. 向每个孔中分配50微升的DHEA-S酶试剂。

4. 向每个孔中分配50微升的抗DHEA-S抗体试剂。

5. 彻底混合板子10秒钟。这一步的完全混合非常重要。

6. 在室温下孵育60分钟。

7. 迅速摇出孔中的内容物。

8. 用稀释的洗涤溶液（每个孔350微升）冲洗孔三次。在吸水纸上用力敲击孔以去除残留液滴。

9. 向每个孔中添加100微升的TMB底物。

10. 在室温下孵育30分钟。

11. 通过向每个孔中添加50微升的终止液来停止酶反应。

12. 在加入终止液后10分钟内，使用ELISA读板仪在450纳米处读取吸光度。

结果计算：

标准曲线的构建如下：

1. 检查每个标准品瓶上的DHEA-S标准值。这个值可能会因批号而异。确保检查每个试剂盒上的值。参见附带的标准品示例。

2. 为了构建标准曲线，在线性坐标纸上，将DHEA-S标准品的吸光度（垂直轴）与标准浓度（水平轴）作图。通过点绘制最佳曲线。

3. 从曲线上读取对照品和每个未知样品的吸光度。记录每个对照或未知样品的值。

Calbiotech-硫酸脱氢表雄酮（DHEA-S）ELISA Kit文献参考：

1. Tietz, N. W., Textbook of Clinical Chemistry, Saunders, 1968   

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