二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是过氧化物酶(POD)的显色底物,DAB显色液主要用于免疫过氧化物酶法,适用于辣根过氧化物酶HRP标记的免疫印记或免疫组化反应。过氧化物酶催化底物发生反应,于反应部位产生棕色沉淀物,免疫印记可直接在膜上显示条带;免疫组化标本显色时间一般为室温5-20分钟,随后在显微镜下观察显色情况,显色充分后应将标本及时脱水封固,其终产物可直接在光镜下观察,也可经OsO4处理后,增加反应产物的电子密度,用于电镜观察。
艾美捷 Biogradetech DAB显色试剂盒:
中文名称:DAB显色试剂盒
英文名字:DAB Substrate Kit (DAB staining)
Biogradetech货号:B-IMWRS51-100T
规格:100T
保存建议:DAB显色试剂盒储存条件:2-8°C避光
本试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色,也可以用于 Western 等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。
DAB显色试剂盒使用参考:
1. 对于组织切片或细胞样品或膜,在与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤 液洗涤3-5次,每次3-5分钟。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适 当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
2. 按照1:1的比例将显色液A、B液混匀,混匀后即配制成DAB染色工作液。
3. 后一次洗涤完毕后,去除洗涤液,加入适量DAB染色工作液,确保能充分覆盖样品。
4. 室温避光孵育3-30分钟或更长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。
5. 去除DAB染色工作液,用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。
6. 对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
注意事项:
DAB 对人体有害,请注意适当防护。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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