生物素偶联试剂盒应用示例&FAQ

生物素偶联试剂盒背景：

生物素是一种水溶性B族维生素，分子量为244Da，由一个脲环与四氢噻吩环稠合而成。戊酸取代基连接到四氢噻吩环的一个碳原子上。生物素与阿维丁或链亲和素具有很高的亲和力，因此生物素-阿维丁系统作为一种多级信号放大系统，广泛应用于免疫检测，具有高灵敏度和强特异性。

FlyLink? 生物素标记试剂盒设计用于直接从含有活性氨基的蛋白质、肽和其他配体制备生物素偶联物。我们试剂盒中提供的生物素已被预激活，可直接用于偶联。FlyLink? 生物素标记试剂盒包含用于制备生物素标记分子的现成组件。

艾美捷生物素偶联试剂盒：

Cat #: D-AKE120

Size: 100 μg x 3

Storage: Stored at 4°C for 6 months, protected from light

AP偶联试剂盒应用示例：

直接标记的一级抗体是有利的，因为它们消除了免疫测定程序中对二级试剂的需求，从而消除了ELISA和Western印迹等应用中繁琐的额外培养和洗涤步骤。

图：原理图FlyLink? 生物素标记试剂盒示意图

适用样品：

标记生物分子，特别是蛋白质、肽和其他含有游离氨基的配体

生物素偶联试剂盒FAQ：

Q1：浓缩后，样品浓度仍低于2 mg/mL？

A1：如果浓缩后样品浓度仍低于2 mg/mL，则可以适当调整标记系统的体积，但最终浓度应大于1 mg/mL。步骤（1）中生物素标记溶液的体积应为标记系统体积的10%。在步骤（2）中，可以不加入去离子水，并且活性生物素溶液的体积保持不变。你也可以根据自己的实验做出适当的调整。

Q2：如何针对待标记样品的不同分子量选择合适的纯化柱？

A2：纯化的柱适用于分子量为100KD至200KD的样品。如果样品的分子量大于200KD或小于100KD，则最好配备更合适的纯化柱尺寸。

Q3：待标记样品的分子量是否与生物素相似？

A3：如果样品的分子量与生物素相似，在完成本说明书对应的标记步骤后，加入30μL 0.5μM NH4Cl，在37°C下孵育10分钟，以猝灭游离的生物素，而无需纯化步骤。

Q4：不同分子量的分子有不同的耦合效应吗？

A4：对于分子量小于5KD的分子，偶联效果较差。你可以适当地增加分子的数量。

*该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。

Biogradetech全球生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商：Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。