脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒的结果分析和数据解读

脂肪酸合酶（FAS）是脂肪酸合成中的关键酶，催化乙酰辅酶A和马来酰辅酶A生成长链脂肪酸。FAS广泛表达于各种组织和细胞中，在哺乳动物的肝脏、肾脏、脑、肺、乳腺和脂肪组织中丰富存在。EZMeta?脂肪酸合酶（FAS）比色活性检测试剂盒提供了一种方便的工具，用于检测FAS活性。其原理是FAS催化乙酰辅酶A、马来酰辅酶A和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+。NADPH在340 nm处具有特征性吸收峰，而NADP+则没有。通过检测340 nm处吸光度的下降速率来计算FAS的酶活性。

艾美捷 脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒：

编号：D-AKC2240

规格：48T / 96T

储存：在-20°C下储存6个月

适用样品：血清、血浆、动物和植物组织、细胞、细菌

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒提供的材料和储存条件：

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒所需材料（但不包括在内）：

· 可测量340 nm处吸光度的微孔板读取器或紫外可见分光光度计

· 96孔UV板或微石英比色皿、精密移液器、一次性移液头

· 冰制造机、冷藏离心机、培养箱

· 去离子水

· 均质器（用于组织样本）

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒试剂准备：

提取缓冲液：按照提供的状态直接使用。在使用前一天取出，放在4°C解冻并彻底混合。使其与室温平衡。储存在-20°C。测定缓冲液：按照提供的状态直接使用。在使用前使其与室温平衡。储存在4°C。NADPH：为96孔加入1.64 mL测定缓冲液，为48孔加入0.82 mL测定缓冲液，溶解后使用。此溶液可以分装后储存在-20°C，以避免反复冻结和解冻。乙酰辅酶A：为96孔加入0.44 mL测定缓冲液，为48孔加入0.22 mL测定缓冲液，溶解后使用。此溶液可以分装后储存在-20°C，以避免反复冻结和解冻。马来酰辅酶A：为96孔加入0.84 mL测定缓冲液，为48孔加入0.42 mL测定缓冲液，溶解后使用。此溶液可以分装后储存在-20°C，以避免反复冻结和解冻。工作试剂：为一个孔准备180 ?L工作试剂，加入16 ?L溶解的NADPH，4 ?L溶解的乙酰辅酶A，8 ?L溶解的马来酰辅酶A和152 ?L测定缓冲液。使用前制备工作试剂，根据需要量进行调配。

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性检测试剂盒样品制备：

注意：推荐使用新鲜样品，如果不立即检测，样品可以在-80°C下储存一个月。

1. 动物组织：称取0.1 g组织，加入1 mL提取缓冲液，在冰上均质。在4°C下以12,000 g离心40分钟。使用上清液进行检测，并将其放在冰上进行测试。

2. 植物组织：称取0.1 g组织，加入1 mL提取缓冲液并研磨。在冰浴中超声波处理5分钟（功率20%或200 W，超声波3秒，间隔7秒，重复30次）。在4°C下以12,000 g离心40分钟。使用上清液进行检测，并将其放在冰上进行测试。

3. 细胞或细菌：收集5×10^6个细胞或细菌到离心管中，用冷PBS洗涤细胞或细菌，离心后弃去上清液；加入1 mL提取缓冲液，在冰浴中超声波处理5分钟（功率20%或200 W，超声波3秒，间隔7秒，重复30次）。在4°C下以12,000 g离心40分钟。使用上清液进行检测，并将其放在冰上进行测试。

4. 血清、血浆或其他液体样品：直接进行检测。

注意：对于脂肪含量较高的动物组织，在离心后去除上层脂肪，然后取上清液。如果通过蛋白浓度计算含量，最好使用EZMeta?脂肪酸合酶（FAS）比色活性检测试剂盒来量化总蛋白质。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途