组织无机磷含量检测试剂盒数据分析和储存条件说明

无机磷主要指无机磷酸盐基团，它参与生物体的各种代谢过程，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化，并且还可以促进碳水化合物的合成、转化和运输。铵钼酸盐与无机磷酸盐反应形成一种在660 nm处具有特征吸收峰的物质。通过测量在660 nm处的吸光度，可以计算出无机磷的含量。

艾美捷组织无机磷含量检测试剂盒：

货号：D-AKC2170

规格：96孔板

储存条件：储存在4°C下，避光，保存12个月

适用样品：动物和植物组织

提供的材料和储存条件：

试剂制备：

试剂I：直接使用，使用前使其恢复至室温。储存在4°C。

试剂II：直接使用，使用前使其恢复至室温。储存在4°C。

试剂III：使用前需准备，加入2 mL去离子水并充分溶解。储存在4°C，避光。

试剂IV：使用前需准备，加入8 mL去离子水并充分溶解。储存在4°C，避光。

磷固定液：按照去离子水：试剂II：试剂III：试剂IV=10：5：2：8的比例准备（请根据实际需要准备），并在同一天使用。

标准品：直接使用，使用前使其恢复至室温。储存在4°C。

样品制备：

1、组织样品：称取0.1克组织，加入1 mL试剂I并在冰上均质化（组织质量（克）：试剂I体积（mL）为1:10）。在4°C下以10,000 g离心10分钟。使用上清液进行分析，并将其放在冰上进行测试。

程序分析：

1. 预热微孔板读取器或可见光分光光度计超过30分钟，并将波长调整为660 nm，可见光分光光度计使用去离子水归零。

2. 操作台（在1.5 mL离心管中进行）：

3. 混合后，将其放入40°C的水浴中加热10分钟，室温冷却10分钟，取200 μL上清液加入可见光分光光度计或96孔板中，然后在660 nm处测量吸光度。空白孔、标准孔和测试孔的吸光度分别记录为ABlank、AStandard和ATest。最后，计算ΔATest=ATest-ABlank，ΔAStandard=AStandard-ABlank。

注意：空白孔和标准孔只需测量1次。为保证实验结果的准确性，需要进行2-3个样品的预实验。适当增加样品数量。如果ΔATest大于1.0，可以使用试剂I适当稀释样品，将计算结果乘以稀释倍数，或适当减少样品数量。

数据分析：

注意：计算公式，包括推导过程和最终公式。两者完全相等。建议使用加粗的简洁计算公式作为最终公式。

（1）按蛋白质浓度计算

无机磷含量（μmol/mg蛋白）=（C标准×ΔATest÷ΔA标准）×V总 ÷ Cpr = 1×ΔATest÷ΔA标准÷Cpr

（2）按样品新鲜重量计算

无机磷含量（μmol/g新鲜重量）=（C标准×ΔATest÷ΔA标准）×V总÷W = 1×ΔATest÷ΔA标准÷W

C标准：1 mmol/L；V总：上清液总体积，1 mL = 0.001 L；W：样品重量，克

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。