CellSafe-BioMycoX支原体PCR检测试剂盒--高灵敏度检测209种支原体

CellSafe-BioMycoX支原体PCR检测试剂盒利用聚合酶链式反应（PCR），这是一种检测细胞培养物和其他细胞培养物中支原体污染的Z高灵敏度选择衍生生物制品。该引物组特异于支原体基因组。这允许检测口腔分枝杆菌、猪鼻分枝杆菌、精氨酸分枝杆菌、发酵分枝杆菌、瘦骨精浆体莱德拉维，人型分枝杆菌，通常在细胞培养中作为污染物出现。此外，该试剂盒可以检测M。肺炎支原体、唾液支原体、滑膜支原体和解脲原体种。真核生物和细菌DNA未扩增BioMycoX支原体PCR检测试剂盒。

艾美捷CellSafe-BioMycoX支原体PCR检测试剂盒（#D-25, D-50, D-100）特点：

筛选研发细胞培养中的支原体污染

高灵敏度检测209种支原体

模板DNA：培养上清液煮沸或从培养细胞中提取基因组DNA

高灵敏度：10~100拷贝/反应

特异性：不检测与支原体有密切亲缘关系的其他细菌种类

UDG系统：防止交叉污染

CellSafe-BioMycoX支原体PCR检测试剂盒灵敏度：

使用此试剂盒进行PCR的灵敏度为每个反应10到100份目标DNA拷贝。在实际培养样本中检测的灵敏度取决于样本制备的质量。

预防交叉污染：

采取措施以Z小化从一个实验到下一个实验核酸的潜在交叉污染。使用不同的工作区和移液管进行模板制备和PCR设置步骤。

2X PCR主混合液中包含dUTP而非dTTP。当dUTP在PCR扩增中取代dTTP时，UNG处理（尿嘧啶-N-糖基化酶，HiSenseTM UDG热敏感，产品编号.SCU-100，不在本试剂盒中提供）可以防止含有dU的PCR产物的后续再扩增。UNG通过水解dU含有的DNA位点上的尿嘧啶-糖苷键，作用于单链和双链dU含有的DNA。通过这种策略，交叉污染被消除，而模板DNA（含有T的DNA）保持完整。

预防交叉污染的注意事项：

在处理试剂盒中包含的阳性对照DNA时可能会发生交叉污染。为了防止交叉污染，在PCR过程中处理阳性对照时使用不同的地点和移液管。确保使用试剂盒中包含的PCR级水，并在实验期间佩戴手套。此外，使用过滤吸头以防止气溶胶。

CellSafe-BioMycoX支原体PCR检测试剂盒凝胶电泳结果：

使用定量的M. arginini（精氨酸菌）基因组DNA进行测试

1. 100bp ladder

2. 104 copies

3. 103 copies

4. 102 copies

5. 101 copies

6. 1 copy

7. 阳性对照

8. 无模板对照

当存在支原体污染时，会出现大约250-300碱基对大小的条带。大约700碱基对的内部控制DNA条带表明PCR反应正常进行。

1) 建议通过添加1μl阳性对照DNA进行无模板对照反应和阳性对照反应。

2) 如果PCR反应受到高浓度的胎牛血清（FBS）抑制，使用基因组DNA作为模板可能会有帮助。

3) PCR抑制物质可能会在细胞培养基中积累（例如，杂交瘤细胞等）。在这种情况下，使用稀释后的样本或基因组DNA作为模板可能会有帮助。

4) 在严重的支原体污染情况下，内部控制DNA条带可能不会出现。

CellSafe致力于提供支原体全面解决方案，可以有效检测、消除和预防影响细胞培养的支原体。作为CellSafe在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的CellSafe产品。