CryoProtX?已经被开发出来,以帮助晶体学家为他们蛋白质晶体找到最佳的低温保护剂。它允许你以一种非常简单易用的方式测试混合配方的低温保护。CryoMixes?(低温混合剂)如图1所示,提供现成的配方,用于单步低温浸泡。此外还提供了盐、PEG(聚乙二醇)和糖类组分,用于微调你的低温保护混合剂,并根据以前的晶体项目改进低温保护剂。
艾美捷MiTeGen-CryoProtX?的特点:
1、保留晶体最高的衍射潜力。
2、现成的混合配方。
3、包含pH值筛选。
4、晶体不太可能出现裂纹或溶解。
5、非常适合重金属原子、配体或回浸处理。
6、筛选对低亲和力、低溶解度抑制剂。
7、可以根据特定项目需求进行定制。
CryoProtX?(表1)包含以下6组:
CryoMixes?:这些混合剂由低温保护剂的多组分配方组成,它们在蛋白质晶体生长中也是有用的沉淀剂
CryoMixes?由于含有的水分少于晶体生长所用的溶液,因此会诱导小的“可重复”的脱水变化。缓冲组分:由广泛的缓冲剂组成(来自Really Useful Buffer Kit)。这些缓冲系统的线性允许快速准备缓冲的低温保护剂溶液。
盐组分(沉淀剂):由浓缩盐和盐混合物组成。在低温保护过程中,盐所提供的脱水效果可能有助于提高分辨率。这些盐组分可以以其纯形式使用,也可以不经缓冲或与不同pH值的缓冲剂混合并测试。
PEG组分(沉淀剂):这些低温沉淀剂的存在抵消了‘低温溶解剂’(甘油、乙烯和丙烯醇)的效果。已经包括了较短链的聚乙二醇,如PEG 400和PEG 550 MME,以及较长链的PEG。这些PEG溶液可以以其纯形式或混合物形式使用,并可以在不同pH值的缓冲剂中或不经缓冲测试。
核心组分:这些组分因其适合保持晶体长时间稳定而被选中。这些组分提供用于在定制步骤中微调低温保护剂时使用。
糖组分(添加剂):糖混合剂已被提供,以便在设计您的低温保护剂溶液时提供更大的灵活性。添加这些可能有助于提高在同步辐射源处的持久性。
文献参考:
Vera, Laura, and Enrico A. Stura. "Strategies for proteincryocrystallography." Crystal Growth & Design 14.2(2013): 427-435.
Holyoak, T., Fenn,T. D., Wilson, M. A, Moulin, A. G.,Ringe D., Petsko G. A. Malonate: A versatilecryoprotectant and stabilizing solution for salt-grownmacromolecular crystals. Acta Cryst D, 2003, 59, 2356–2358.
Newman, J. Novel buffer systems for macromolecularcrystallization. Acta Cryst D, 2004, 60, 610-612.
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