在Hycult Biotech,我们深知准确分析补体(complement)系统的重要性。这不仅需要使用正确的技术,还需要在样本处理上遵循正确的预分析程序,以避免错误的结果。我们的资深科学家Erik Toonen,专注于补体研究,以及由Ricardo Brandwijk领导的专业团队,也专注于补体研究,他们在Pubmed/MEDLINE数据库上进行了广泛的文献搜索。他们的重点是研究在2017年2月至2022年2月期间发表的、测量人类血样中关键补体成分的研究。他们审查了这些研究是否使用了正确的样本类型和技术来进行补体分析。以下是他们的发现。
桌面分析
在376项研究中,共有92项被选为全文分析。其中45项(49%)被认定为使用了正确的样本类型和技术进行补体分析,而25项(27%)没有使用正确的样本类型或技术。对于22项研究(24%),没有指明使用了哪种样本类型。
在审查的研究中,相当一部分没有使用适当的样本类型来评估补体激活,或者没有提及使用了哪种样本类型。这种偏离标准化程序的做法可能导致对补体生物标志物水平的误解,并妨碍了不同研究之间补体测量结果的适当比较。因此,本研究强调了制定准确和推荐程序的一般指南的必要性。
适当的样本类型
选择正确的样本类型至关重要,首先要区分你是在评估补体系统的总体功能还是特定成分。当你的重点是评估补体功能时,使用补体保存血清至关重要。相反,当你打算评估个别补体成分时,应使用EDTA-血浆。下面的流程图帮助你确定合适的样本类型,并指导你选择最合适的样本预处理方法。
适当的技术
如果你想确定哪种技术或检测最适合你的研究,同样重要的是要确定你是在进行补体功能的评估还是个别补体成分的评估。在评估补体功能时,最合适的技术包括溶血活性测定、功能性ELISA或功能化脂质体。对于评估个别补体成分,首选的方法是免疫比浊法、ELISA、多重检测、组学/蛋白质芯片或质谱分析。
你可以在下面找到可选指南,或者直接联系我们以获得帮助。
参考:
Brandwijk RJMGE, Michels MAHM, van Rossum M, de Nooijer AH, Nilsson PH, de Bruin WCC, Toonen EJM. Pitfalls in complement analysis: A systematic literature review of assessing complement activation. Front Immunol. 2022 Oct 18;13:1007102. doi: 10.3389/fimmu.2022.1007102. PMID: 36330514; PMCID: PMC9623276.
补体研究流程图,
帮助你选择: (A) 适当的样本类型 (B) 评估补体的适当技术。
补体途径
补体系统是免疫系统的关键部分,由30多种蛋白质组成,共同帮助识别和摧毁外来病原体。补体激活有三个主要途径:经典途径、凝集素途径和替代途径。
1、经典途径,在抗体结合到病原体表面的特定抗原时被激活。这种结合触发了一系列补体蛋白的结合和激活,最终导致形成膜攻击复合体(MAC),刺破并摧毁病原体的细胞膜。
2、凝集素途,径在称为凝集素的蛋白质结合到病原体表面的某些糖时被激活。这种结合触发了一系列类似的补体蛋白激活,导致形成MAC并摧毁病原体。
3、替代途径,始终在低水平上活跃,并且可以通过病原体表面或受损宿主细胞上的某些分子的存在而被触发。这条途径也导致形成MAC并摧毁病原体。
所有三个补体途径共同工作,为抵御入侵病原体提供快速有效的防御。它们还在调节免疫反应和清除受损宿主细胞中发挥作用。补体系统的功能障碍可能导致各种疾病,包括自身免疫性疾病和感染。
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