补体TCC是一种酶免疫测定法,用于半定量测定可溶性人EDTA血浆中的末端补体复合物(sTCC,也称为TCC或sC5b-9)。该产品仅供专业人士使用。结果不得用于临床诊断或患者管理,仅供研究使用。
艾美捷Svar Life Science-Complement TCC:
产品代码 COMPL TCC RUO
检测目标 TCC
规格 96孔
技术 ELISA
结果读取 半定量
范围 0-400纳克/毫升
检测时间 2小时
检测系统 辣根过氧化物酶/TMB在450纳米处读取
监管状态 仅供研究使用
Svar Life ScienceiLite-Complement TCC内容:
一个带有微孔板孔(12x8)的框架,孔内涂有抗TCC单克隆抗体,密封在带有干燥剂的铝箔包装中。
1.5毫升低浓度对照(LC)。可直接使用。
1.5毫升高浓度对照(HC)。可直接使用。
2瓶30毫升稀释液(Dil)。可直接使用。
15毫升含有辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TCC抗体的结合物。可直接使用。
15毫升底物TMB。可直接使用。
15毫升终止液(0.5M硫酸)。可直接使用。
30毫升洗涤液,30倍浓缩。
6瓶1.5毫升的校准液,含有人类纯化的TCC,浓度分别为0纳克/毫升、10纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升、200纳克/毫升和400纳克/毫升。可直接使用。
Svar Life ScienceiLite-Complement TCC检测原理:
该检测是一种比色夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)。样本在测定稀释液中稀释,并将100微升稀释后的样本转移到微孔板孔中,在室温下孵育60分钟。在第一次孵育期间,样本中的TCC被预先涂覆在微孔板表面的抗TCC单克隆抗体捕获。经过洗涤去除未结合的物质后,添加第二种辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体以检测与孔结合的TCC。再孵育30分钟后,孔再次被洗涤,并添加底物并进行孵育。颜色发展在30分钟后停止,颜色在分光光度计中被测量。颜色与与孔结合的TCC量直接成比例。通过与校准样本的颜色发展进行比较,确定TCC的量。
结果计算
从450纳米波长中减去参考波长,并计算所有样本的平均光密度(OD)值。通过将校准液的OD值与浓度作图,构建校准曲线。六个校准液的值分别为0纳克/毫升、10纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升、200纳克/毫升和400纳克/毫升。根据校准曲线读取未知样本的浓度。
注意:本使用说明书中的所有性能数据都是使用四参数曲线拟合计算的。用户可以选择不同的曲线拟合。建议每个实验室使用选定的曲线拟合建立参考范围。
注意:计算样本中TCC的浓度时,必须根据上面的协议进行稀释补偿,即10倍稀释。如果样本结果超出校准曲线的范围,建议进行更高倍数的稀释,并在计算样本中的浓度时考虑这一点。
校准器曲线示例:
请注意:上图显示了半定量标准曲线的示例,不应用于实际样品解释
文献参考:
Bergseth et al. Molecular Immunology 56 (2013) 232–239. An international serum standard for
application in assays to detect human complement activation products
Deppisch et al, Kidney Int. 1990 Feb;37(2):696-706. Fluid phase generation of terminal
complement complex as a novel index of bioincompatibility
Harboe et al, Adv Drug Deliv Rev. 2011 Sep 16;63(12):976-87. Advances in assay of
complement function and activation.
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