Worthington 胶原蛋白酶（无动物）特异性说明

胶原酶是在三螺旋区域消化天然胶原蛋白的内肽酶。胶原蛋白是动物细胞外结缔组织的主要纤维成分。细菌胶原酶与脊椎动物胶原酶的不同之处在于它们表现出更广泛的底物特异性（Peterkofsky 1982， Birkedal-Hansen 1987）。与动物胶原酶不同，动物胶原酶将胶原蛋白分裂成其天然的三螺旋构象（Woolley et al. 1975， Gross et al. 1974），细菌胶原酶是独一无二的，因为它可以降解水不溶性天然胶原蛋白和水溶性变性胶原蛋白。它可以攻击几乎所有的胶原蛋白类型，并且能够在三重螺旋区域内进行多次裂解（Mookhtiar and Van Wart 1992）。   

作为Worthington全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Worthington主要产品胶原蛋白酶（无动物）。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。  

Worthington胶原酶：

纯化的胶原酶，代码：CLSPA/CLSPANK，含有最少的二级蛋白水解活性以及高胶原酶活性。

1型部分纯化的胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。 

2型含有较高水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。

3型含有最低水平的二级蛋白酶。

4型胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损伤。

5型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。

6型含有高胶原酶活性，酪蛋白酶与胶原酶的比例~2：1。设计用于富集相对于 I 型胶原酶 II 型（col H）胶原酶（col G）。

7型胶原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型胶原酶高四倍。  

无动物类型 AFA、AFB、AFC、STZ1 和 STZ2 胶原酶来源于在完全不含动物性成分的培养基中生长的培养物，专为生物工艺应用而设计，其中介绍必须预防潜在的动物源性病原体。二级蛋白酶的水平与1型和2型胶原酶相似。

CLSAFA 是原始的 AF 等级，旨在具有类似于 1 型和 2 型胶原酶的胶原酶和二级蛋白酶。

CLSAFB含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。

CLSAFC具有特别低的胰蛋白酶活性，类似于4型胶原酶。

STZ1 和 STZ2，0.22μ 过滤 STEMxyme? AF 胶原酶/中性蛋白酶（Dispase?）混合物，用于原代和干细胞分离。 

粗制剂不仅含有几种胶原酶，还含有巯基蛋白酶，梭菌蛋白酶（Mitchell 1968），胰蛋白酶样酶（Peterkofsky和Diegelmann 1971，Sparrow和McQuade 1973）和氨基肽酶（Kessler和Yaron，1973）。Sugasawara和Harper（1984）和Bond和Van Wart（1984）报告了溶组织梭菌胶原酶的纯化。  

胶原蛋白酶（无动物）特异性：

I类和II类酶最初攻击所有三种胶原蛋白类型的高反应位点由French等人（1992）鉴定。切割位点都在重复的Gly-X-Y胶原序列中的Yaa-Gly键上（Barrett 1998）。梭菌胶原酶将天然三螺旋I、II和III型胶原蛋白消化成小肽混合物的能力是其主要区别因素。这是通过在三螺旋中进行多次剪裁来实现的。消化是通过将这些片段水解成小肽的混合物来完成的。相反，脊椎动物胶原酶通过在所有三个α链上进行单次剪裁来启动胶原分解，之后对这些α链的攻击非常有限。明胶酶和其他蛋白酶仅在三螺旋变性后进行胶原溶解（Barrett 1998）。

胶原蛋白酶（无动物）应用：

从肺、上皮和肾上腺组织中分离脂肪细胞、肝细胞和细胞 

从骨骼、软骨、肌肉、甲状腺和内皮中分离心肌细胞和细胞 

分离乳腺和各种其他软组织 

分离人和猪胰岛细胞（Kin 2007） 

用粗胶原酶处理组织，其蛋白水解活性混合物，提供温和，选择性的细胞间基质消化，对细胞几乎没有损伤或活力丧失 

AFA胶原酶适用于需要避免将动物源性病原体引入生物工艺程序的应用 

对于胶原蛋白结构和生物合成研究，研究人员通常使用不含其他蛋白水解活性的高度纯化的胶原酶制剂。

对于组织解离，大多数研究人员使用粗胶原酶制剂，如CLS1，CLS2，CLS3和CLSAFA，以及其他酶，如弹性蛋白酶，胰蛋白酶和/或木瓜蛋白酶。

酶是Worthington的主要产品线。从技术上讲，Worthington实际上并不制造酶，而是从各种动植物组织和各种微生物来源（如细菌、真菌和霉菌）中提取酶。根据该酶在材料中的普遍性选择特定酶的起始材料。例如，一种功能涉及使肌肉工作的酶将主要存在于肌肉组织中，因此起始材料可能是兔肌肉或猪心；参与发酵的酶最好在酵母中找到。 Worthington使用的一些动物组织包括牛胰腺、猪肾、牛眼、马肝、兔肌肉、牛肝、猪心、马血和小牛肠。各种蛋白质也从辣根、红薯、杏仁和美洲商陆中提取。一些产品是从大肠杆菌、几种梭状芽胞杆菌和各种其它细菌中分离出来的。还使用酵母、蘑菇、全脂牛奶和鸡蛋等。   

Worthington是一家通过的ISO9001认证的家族企业。主要生产用于生物技术和生命科学研究，诊断，生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶，蛋白质，核酸和试剂盒。作为生命科学领域知名的酶类供应商，以及细胞分离酶的专家级公司，其核心酶产品包括：胶原蛋白酶，脱氧核糖核酸酶I，弹性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。