CUT&Tag试剂盒：快速获得高信噪比的结果

Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag)是一种新兴的DNA-蛋白质互作研究方法。CUT&Tag以融合了protein A/G的Tn5转座酶为核心，融合蛋白通过protein A/G与抗体结合，使得Tn5被栓系在靶位点周围，从而在目的位点附近进行酶切反应，并同时引入二代测序所必需的接头序列，产物DNA经过后续提取与PCR扩增后，得到直接用于测序的文库。CUT&Tag与传统的ChIP-Seq技术相比较，实验不需要超声打断，也不需要传统的连接法添加测序接头，操作简单、周期短、信噪比高、重复性好、细胞用量少，为极低起始细胞量和单细胞测序研究提供了可能性。

自2019年CUT&Tag技术诞生以来，经过大量的实践，发现该技术在组蛋白修饰及部分转录因子与DNA互作研究中可以获得高信噪比的结果，但是针对一些与DNA结合力较弱或者结合具有高度动态性的DNA结合蛋白，较难得到理想的实验结果。

艾美捷CUT&Tag试剂盒特点：

1、高浓缩： 使用独特的核酸切割酶混合物，其具有低序列偏倚，以同时片段化染色质并切割/去除靶蛋白/DNA复合物两端的任何DNA序列，而不影响靶蛋白占据的DNA。因此，可以可靠地鉴定真正的靶蛋白富集区域，并且可以实现高分辨率定位。

2、低投入材料： 稳健的无超声片段化、未结合DNA切割和免疫捕获均在同一单管中进行，并采用珠上连接。该方法允许在细胞和组织中使用，并允许以Z小的样品损失对靶蛋白进行Z大的降解保护。结果，输入细胞量可以少至500个细胞或染色质量可以低至50 ng。

3、原位标记： 在DNA纯化之前，DNA衔接子与染色质的珠上连接（原位）导致DNA片段大小增加，允许纯化与转录因子（TF）结合的非常短的片段（例如：< 70 bp）用于文库构建。

4、Z低背景： 在靶蛋白/DNA复合物的两（2）端原位切割未结合的DNA序列能够使免疫捕获/测序背景Z小化，从而允许使用<1000万个读数进行数据分析。

5、快速、简化的程序： 从细胞到文库DNA的过程不到5小时。

6、非常方便：该试剂盒包含CUT&Tag原位测序每个步骤所需的所有组件，足以用于蛋白质/DNA捕获和捕获的DNA文库制备，从而使cTIP（CUT&Tag In-Place）测序试剂盒Z方便，结果可靠且一致。

CUT&Tag试剂盒反应图示：

DNA-Target Protein-Antibody-ChipTag结合示意图