大肠杆菌LacZ基因是用于检测载体介导的基因转移的表达效率的常用报告基因。它也经常用于研究基因启动子调控。LacZ编码β-半乳糖苷酶,这是一种几乎完全理想的表达选择,因为它非常稳定,对蛋白水解降解具有抗性,能够利用多种底物,并且易于原位检测。
AkrivisBio 的β-半乳糖苷酶染色试剂盒是一种简单、灵敏的检测方法,它利用X-Gal(一种无色底物),产生强烈的蓝色不溶性靛蓝产物,在显微镜下很容易观察到。
艾美捷AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色试剂盒:
Catalog:COS-0104
Size: Includes reagents to stain 20 x 12-well plates or the equivalent volume of 6 or 24-well plates.
Sample Type:Adherent Cells, Suspension Cells
Species:All
Method of Detection:Light Microscopy
Assay Type:Qualitative
Application:For visualizing β-Galactosidase activity in cells under a light microscope.
Range The response is highly linear between 10000 – 100000 cells per well
Storage Conditions:-20°C
Shipping Temperature:Gel Pack
Shelf Life:One year from the date of delivery
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目录:COS-0104
尺寸:包括用于染色20 x 12孔板或等效体积的6或24孔板的试剂。
样品类型:粘附细胞、悬浮细胞
物种:全部
检测方法:光学显微镜
化验类型:定性
应用:用于在光学显微镜下观察细胞中β-半乳糖苷酶的活性。范围反应高度线性,每孔10000–100000个细胞
储存条件:-20°C
运输温度:凝胶包装
保质期:一年
AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色试剂盒组成:
固定剂125 ml NM COS-0104-A
X-Gal冻绿COS-0104-B
染色缓冲液125 ml WM COS-0104-C
染色补充1.5 ml红色COS-0104-D
用户提供的材料:
PBS~1L
DMSO或DMF
聚丙烯管,如Eppendorf和类似的带帽锥形微管。不要使用聚苯乙烯容器。70%甘油
染色方案:
A.一般考虑:
该方案是为12孔培养板中的孔设计的。如果使用其他板,则按比例增加或减少体积。
B.试剂制备:
将20 mg X-Gal溶解在1 ml DMSO或DMF中,提供20倍储备溶液。未使用的X-Gal溶液可以在–20°C下储存长达一个月。
注意:一定要使用聚丙烯容器或玻璃制作和储存X-gal。不要使用聚苯乙烯。如果发生沉淀,只需加热溶液即可重新溶解沉淀。
C.污点:
取出培养基并用1ml PBS洗涤细胞一次。在室温下用0.5毫升Fixative固定细胞10-15分钟。当细胞处于固定剂中时,仅使用聚丙烯管制备以下染色溶液。每个孔需要0.5 ml。准备足够的染色溶液,用于使用:染色缓冲液:470?l染色补充液:5?l20 mg/ml X-gal在DMF 25?l4中染色的孔数。用1ml PBS洗涤细胞两次。向每个孔中加入0.5 ml染色溶液,盖上平板,在37°C.6下孵育过夜。第二天,在显微镜下以约200倍的放大倍数观察细胞的蓝色。为了长期保存染色板,去除染色溶液并用70%甘油覆盖细胞。在4°C下储存。
AkrivisBio 致力于鉴别、开发和提供高质量的生物试剂和工具,这些试剂和工具在药物发现、诊断和基础研究等多个领域和应用中起着至关重要的作用。艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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