细胞衰老是细胞停止分裂的现象。衰老可由内部(氧化应激、DNA损伤等)和外部(毒素、紫外线等)因素诱导。衰老是一种生长停滞的状态,细胞在这种状态下保持活力但停止分裂。衰老细胞表现出细胞大小增加,β-半乳糖苷酶、p53和P16活性的衰老相关表达,以及基因表达模式的改变。
AkrivisBio 的衰老检测试剂盒旨在检测β-Gal活性。β-Gal主要存在于衰老细胞中,但在正常表达β-Gal的细胞(如成熟巨噬细胞)中可能出现假阳性。
艾美捷AkrivisBio 细胞衰老染色试剂盒:
Catalog:COS-0102
Size: Includes reagents for staining 24-, 12-, 6- well plates
Sample Type:Cultured Adherent Cells
Species:All
Method of Detection:Light Microscopy
Assay Type:Qualitative
Application:To detect β-Gal activity in senescent cells under a light microscope.
Storage Conditions:4°C
Shipping Temperature:Gel Pack
Shelf Life:One year from the date of delivery
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目录:COS-0102
尺寸:包括用于染色24、12、6孔板的试剂
样品类型:培养的粘附细胞
物种:全部
检测方法:光学显微镜
化验类型:定性
应用:在光学显微镜下检测衰老细胞中β-Gal的活性。
储存条件:将试剂盒储存在4°C温度下。溶解X-gal后,将溶液储存在-20°C,避光。
运输温度:凝胶包装
保质期:一年
AkrivisBio 细胞衰老染色试剂盒组成:
固定液125 ml NM COS-0102-A
X-Gal(150 mg,冻干)1小瓶绿色COS-0102-B
含液125 ml WM COS-0102-C
含补充剂1.5 ml红色COS-0102-D
-以下协议是为12孔板中的每个孔设计的。如果使用不同的板,则相应地调整体积(例如,对于6孔板,将体积加倍,对于24孔板,将体积减半)。
-制备PBS溶液(未提供)。每孔3毫升。
-X-gal溶液:X-gal具有吸湿性。在打开小瓶之前,让其达到室温30分钟。称取20 mg X-gal至琥珀色或铝箔包裹的管,加入1ml N,N-二甲基甲酰胺,制备20X储备溶液。未使用的X-gal溶液可以在–20°C(避光)下储存1-2个月。始终使用装有X-gal溶液的聚丙烯或玻璃容器。请勿使用聚苯乙烯。
-固定液、染色液和染色补充剂(100X)可在4°C下储存。
-如果使用染色溶液或染色补充液发生沉淀,将溶液加热至37°C,使沉淀物重新溶解。如果沉淀仍然存在,离心小瓶并使用上清液。
衰老检测:
1.通过在孔边缘抽吸从孔中取出培养基,并用1ml PBS洗涤细胞一次。
2.在室温下用0.5ml固定液固定细胞10-15分钟。细胞固定时准备染色。准备充分要染色的孔数的溶液。对于每口井,准备:染色溶液470?l染色补充剂5?lX-gal在25?l DMF中
3.用1ml PBS洗涤细胞两次。
4.向每个孔中加入0.5 ml的染色溶液混合物。盖住盘子。在37°C下培养过夜。
5.在显微镜下观察细胞是否出现蓝色(40–400 X)。
6.对于染色板的长期储存,去除染色溶液并向细胞中添加70%甘油。在4°C下储存。
AkrivisBio 致力于鉴别、开发和提供高质量的生物试剂和工具,这些试剂和工具在药物发现、诊断和基础研究等多个领域和应用中起着至关重要的作用。艾美捷科技是AkrivisBio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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