Svar Life Science末端补体复合物（TCC）检测试剂盒计算方法&文献参考

补体系统在各种病理条件下的组织水平上对炎症过程的发展和放大起着关键作用。在溶血性尿毒症综合症（HUS）（Noris 2012）、系统性红斑狼疮（SLE）（Porcel 1995，Mollnes 1999）和类风湿关节炎（RA）（Struglics 2016）等情况下，可以检测到TCC水平的升高。补体系统也可以通过人工表面激活，例如在血液透析或心肺旁路过程中，导致TCC水平的增加（Deppish 1990，Ovrum 1996）。TCC也非常适合用于研究医疗设备中生物材料引起的补体激活（Stang 2014）。

与其他补体激活产物一样，TCC可以通过使用特异性新表位的单克隆抗体进行测定。新表位在天然补体成分中是隐藏的，补体激活后会暴露出来（Mollnes 1985，Mollnes 1993）。

补体TCC是一种酶免疫测定法，用于人类EDTA血浆中可溶性终末补体复合物（sTCC，也称为TCC或sC5b-9）的半定量测定。该产品供专业人士使用。结果不得用于临床诊断或患者管理。仅限研究使用。

艾美捷Svar Life Science末端补体复合物（TCC）检测试剂盒（#COMPLTCCRUO）内容：

一个带有微孔板（12x8）的框架，涂有抗TCC单克隆抗体，密封在带有干燥剂的箔包装中。

1.5毫升低浓度对照（LC）。准备使用。

1.5毫升高浓度对照（HC）。准备使用。

2瓶x30毫升稀释液（Dil）。准备使用。

15毫升含有针对TCC的HRP标记抗体的结合物。准备使用。

15毫升底物TMB。准备使用。

15毫升终止液（0.5M H2SO4）。准备使用。

30毫升洗涤液，30倍浓缩。

6瓶x1.5毫升含有人纯化TCC的校准液，0纳克/毫升、10纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升、200纳克/毫升和400纳克/毫升。准备使用。

末端补体复合物（TCC）检测试剂盒检测原理：

该测定是一种比色夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）。样本在测定稀释液中稀释，将100微升稀释样本转移到微孔板孔中，并在室温下孵育60分钟。在这第一次孵育期间，样本中的TCC被预涂在微孔板表面的抗TCC单克隆抗体捕获。洗涤去除未结合的物质后，添加第二种辣根过氧化物酶（HRP）标记的单克隆抗体以检测结合到孔中的TCC。孵育30分钟后再次洗涤孔，然后添加底物并孵育。30分钟后停止颜色发展，并在分光光度计中测量颜色。颜色与结合到孔中的TCC量成正比。通过与校准样本的颜色发展比较，确定TCC的量。

末端补体复合物（TCC）检测试剂盒结果计算：

从450纳米波长减去参考波长，并计算所有样本的平均OD值。通过绘制校准品的OD与浓度的校准曲线。六个校准品的值分别为0纳克/毫升、10纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升、200纳克/毫升和400纳克/毫升。根据校准曲线读取未知样本的浓度。

注意：本使用说明书中的所有性能数据都是使用4参数曲线拟合计算的。用户可以选择不同的曲线拟合方式。建议每个实验室使用选定的曲线拟合建立参考范围。

注意：计算样本中TCC的浓度时，必须根据上述协议进行稀释补偿，即10倍。如果样本结果超出校准曲线，则建议进行更高稀释，并在计算样本中的浓度时考虑这一点。

图1。校准器曲线示例

请注意：上图显示了半定量标准曲线的示例，不应用于实际样品解释。

末端补体复合物（TCC）检测试剂盒文献参考：

Bergseth et al. Molecular Immunology 56 (2013) 232–239. An international serum standard for

application in assays to detect human complement activation products

Deppisch et al, Kidney Int. 1990 Feb;37(2):696-706. Fluid phase generation of terminal

complement complex as a novel index of bioincompatibility

Harboe et al, Adv Drug Deliv Rev. 2011 Sep 16;63(12):976-87. Advances in assay of

complement function and activation.

Mollnes et al. Scand. J, Immunol. 22, 197-202. 1985. Quantification of the Terminal

Complement Complex in Human Plasma by an Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Based

on Monoclonal Antibodies against a Neoantigen of the Complex