Wieslab 补体系统MBL途径试剂盒是一种酶免疫测定法,用于定性测定人血清中的MBL补体途径。用于体外诊断。
艾美捷Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒(#COMPLMP320)组分和试剂的储存:
一个带有无色可分离孔(12x8)的框架,密封在带有干燥剂包的铝箔袋中。孔已涂有甘露聚糖。
35毫升MBL途径稀释液(Dil MP),标为绿色。
13毫升含有碱性磷酸酶标记的C5b-9抗体的结合物(蓝色)。
13毫升即用型底物溶液。
30毫升30倍浓缩洗涤液。
0.2毫升阴性对照(NC),含有人血清(需按患者血清样本进行稀释)。
0.2毫升阳性对照(PC),含有冻干人血清,见下文“阳性对照的重组”。 试剂盒中的所有试剂除洗涤液和对照外,均已准备好使用。试剂应储存在2-8°C,除阳性对照外。阳性对照必须储存在-20°C。
Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒测定原理:
Wieslab?补体测定结合了补体激活的溶血测定原理和使用针对补体激活产生的新抗原的标记抗体。产生的新抗原量与补体途径的功能性活性成正比。
在补体MP试剂盒中,微孔板条的孔涂有MBL途径的特异性激活剂。患者血清被稀释在含有特定阻断剂的稀释液中,以确保只激活MBL途径。在将稀释的患者血清孵育于孔中时,补体通过特定涂层被激活。
然后洗涤孔,并使用特定的碱性磷酸酶标记的抗体检测C5b-9,该抗体在MAC形成过程中表达的新抗原。
在进一步的洗涤步骤之后,通过与碱性磷酸酶底物溶液孵育来检测特定抗体。补体激活的量与颜色强度相关,以吸光度(光密度(OD))来测量。
体外补体序列的激活导致补体组分的消耗,进而导致其浓度降低。因此,补体蛋白或补体活性的测定用于指示补体系统是否已被免疫和/或病理机制激活。当怀疑存在补体激活疾病或可能存在遗传性缺陷时,使用功能性和免疫化学补体测量来评估患者。功能性测定(如Wieslab?补体试剂盒)评估的补体活性水平考虑了组分的合成、降解和消耗速率,并提供了路径完整性的量度,与免疫化学方法相对,后者专门测量各种补体组分的浓度。当发现补体组分或补体功能水平降低时,临床医生会考虑存在缺陷或进行中的免疫过程,导致组分分解增加和补体水平降低。补体水平的增加通常是急性期反应的非特异性表现。
Wieslab?补体系统MBL途径有助于检测与MBL途径相关的补体缺陷,如下表所示:使用Wieslab?补体系统筛选,可以实现对所有三条补体途径更完整和深入的功能性评估。
Svar Life Science补体凝集素/MBL途径检测试剂盒文献参考:
1.Walport M, Complement (First of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1058-1066.
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3.Roos A, Bouwman L, Munoz J et al. , Functional characterization of the lectin pathway of complement in human serum.Mol Immunol 2003, 39, 655-668.
4.Nordin Frediksson G, Truedsson L, Sj?holm A. New procedure for detection of complement deficiency by ELISA. J Imm Meth 1993, 166, 263-270.
5.M.A. Seelen et al, Functional analysis of the classical, alternative and MBL pathways of the complement system:standardization and validation of a simple ELISA. J Imm Meth 2005, 296, 187-198.
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