Svar Life Science补体P因子定量检测试剂盒结果评估方案

该产品的目的是定量测试样本中人类因子P的含量。该产品仅供经过培训的实验室人员使用。不得使用结果用于临床诊断或患者管理。仅供研究使用。

艾美捷Svar Life Science补体P因子定量检测试剂盒（#COMPL FPQ RUO）内容：

一个带有微孔板（12x8）的框架，涂有抗因子P单克隆抗体，密封在带有干燥袋的箔包装中。

3.0毫升装有校准液（200纳克/毫升）的小瓶。准备使用。校准液必须根据9.1.2节的说明进一步稀释。

1.5毫升低浓度对照（LC），绿色，绿色盖子。准备使用。

1.5毫升高浓度对照（HC），红色，红色盖子。准备使用。

2个32毫升稀释液（Dil），红色。准备使用。

30毫升洗涤液，30倍浓缩。

15毫升含有针对因子P的HRP标记抗体的结合物，蓝色，棕色瓶。准备使用。

15毫升底物TMB，棕色瓶。准备使用。

15毫升终止液（0.5M H2SO4）。准备使用。

需要但未提供的物料或设备

带有450纳米和620纳米滤光片的微孔板读取器

轨道摇床（除非微孔板读取器包含此功能）

带有一次性吸头的精密移液器

96孔板或条的洗涤器

吸水纸

试剂和样本稀释用的容器

计时器

补体P因子定量检测试剂盒测定原理：

P因子定量测定是一种用于定量人P因子的夹心ELISA例如，血清或血浆样本。该测定基于固定化96孔板中的抗体，捕获孵育的测试样本中存在的因子P在盘子里。用标记有以下物质的二抗检测结合因子PHRP。HRP随后催化底物的切割，诱导颜色与测试样品中因子P浓度相关的变化。

稳定性和储存：

试剂应储存在2-8°C。在2-8°C下储存时，稀释的洗涤液为在试剂盒有效期之前保持稳定。

Svar Life Science补体P因子定量检测试剂盒结果评估：

对于每个数据点，从450纳米波长减去620纳米参考波长，并计算所有重复样本的平均吸光度值。

通过绘制六个校准品的吸光度与浓度（0纳克/毫升、12.5纳克/毫升、25纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升和200纳克/毫升）的校准曲线。

在这个应用说明（图2）的示例中使用了4参数曲线拟合，但用户可以选择不同的曲线拟合方式。根据校准曲线读取未知样本的浓度。

注意：为了计算样本中因子P的浓度，必须根据上述协议进行稀释补偿，即200倍。如果选择了不同的样本稀释度，应相应进行补偿。

图:校准器曲线示例

请注意：上图显示了一个标准曲线的示例，不应用于实际样品解释。

补体P因子定量检测试剂盒文献参考：

1.Cortes, C.; Ohtola, J. A.; Saggu, G.; Ferreira, V. P. Local Release of Properdin in the Cellular

Microenvironment: Role in Pattern Recognition and Amplification of the Alternative Pathway of Complement.Front Immunol 2013, 3.

2.Pangburn, M. K. Analysis of the Natural Polymeric Forms of Human Properdin and Their Functions in Complement Activation. The Journal of Immunology 1989, 142 (1), 202–207.

3.Smith, C. A.; Pangburn, M. K.; Vogel, C. W.; Müller-Eberhard, H. J. Molecular Architecture of Human Properdin, a Positive Regulator of the Alternative Pathway of Complement. J. Biol. Chem. 1984, 259 (7),4582–4588.