Svar Life Science-Wieslab 补体系统替代途径试剂盒是一种免疫测定法,用于定性测定功能性替代补体途径和测定人血清中的补体缺乏。
Wieslab补体测定将途径的特异性激活与使用对补体激活产生的末端补体复合物C5b-9的新表位特异的标记抗体相结合。产生的C5b-9的量与补体系统的功能活性成正比。与传统的溶血检测相比,方便的ELISA技术具有几个优点。
艾美捷Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径:
产品代码 COMPLAP330
检测目标 CDC(补体依赖性细胞毒性)
技术 基于细胞的报告基因检测
结果读取 定量
检测系统 发光
监管状态 仅供研究使用
内容:
一个带有无色可分离孔(12x8)的框架,密封在带有干燥剂的铝箔包装中。孔内涂有LPS。
35毫升替代途径稀释液(Dil AP),标记为红色。
13毫升含有碱性磷酸酶标记的抗C5b-9抗体的结合物(蓝色)。
13毫升即用型底物溶液。
30毫升30倍浓缩的洗涤液。
0.2毫升阴性对照(NC),含有人血清(需像患者血清样本一样稀释)。
0.2毫升阳性对照(PC),含有冻干人血清,见下文“阳性对照的重组”。 除了洗涤液和对照品外,试剂盒中的所有试剂都可以直接使用。试剂应储存在2-8°C的环境中,除了阳性对照。阳性对照必须储存在-20°C。
Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径检测原理:
Wieslab?补体测定结合了补体溶血测定的原理,使用对新抗原特异性的标记抗体进行活化补体激活。新抗原的产生量与以下物质的功能活性成正比补充途径。
在补体系统AP试剂盒中,微量滴定条的孔涂有特定的活化剂替代途径。患者血清在含有特定阻断剂的稀释剂中稀释,以确保只有替代途径被激活。在将稀释的患者血清在孔中孵育期间,补体被特定的涂层激活。
然后洗涤孔,用标记的特异性碱性磷酸酶检测C5b-9抗MAC形成过程中表达的新抗原的抗体。在进一步的洗涤步骤后,通过与碱性物质孵育来检测特异性抗体磷酸酶底物溶液。补体激活量与颜色相关强度,并以吸光度(光密度(OD))来测量。
Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径文献参考:
1.Walport M, Complement (First of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1058-1066.
2.Walport M, Complement (Second of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1140-1144.
3.Roos A, Bouwman L, Munoz J et al., Functional characterization of the lectin pathway of
complement in human serum. Mol Immunol 2003, 39, 655-668.
4.Nordin Frediksson G, Truedsson L, Sj?holm A. New procedure for detection of complement
deficiency by ELISA. J Imm Meth 1993, 166, 263-270.
5.M.A. Seelen et al, Functional analysis of the classical, alternative and MBL pathways of the
complement system: standardization and validation of a simple ELISA. J Imm Meth 2005,
296,187-198.
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