CD40:CD40L TR-FRET检测测定原理说明

CD40是一种主要表达在B细胞、单核细胞、巨噬细胞和某些树突细胞表面的共刺激分子。它通过与CD40配体（CD40L，也称为CD154）结合，发挥其生物学功能，主要参与免疫应答的调节，特别是在T细胞依赖的B细胞激活和抗体产生过程中。

CD40-CD40L的相互作用是免疫系统中一个关键的信号通路，它促进B细胞的增殖、分化和存活，同时增强抗体的类别转换。此外，CD40信号还参与树突细胞和巨噬细胞的成熟过程，从而影响T细胞的激活和整个适应性免疫反应。

CD40在多种疾病的发病机制中扮演着角色，包括自身免疫疾病、炎症性疾病和某些类型的癌症。例如，在某些自身免疫疾病中，CD40信号的异常激活可能导致B细胞功能失调，进而产生自身抗体。

鉴于CD40在免疫调节中的核心作用，它已成为治疗某些疾病的潜在靶点。通过靶向CD40或其配体的生物制剂，可以调节免疫反应，治疗如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫疾病。

CD40:CD40L TR-FRET检测试剂盒旨在测量CD40（分化簇40）与CD40L（CD40配体）的结合活性，用于使用TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）进行筛选和分析应用。它使用铽标记的供体和标记的受体来完成TR-FRET配对。CD40:CD40L TR-FRET检测试剂盒采用方便的384孔格式，含有足够的重组生物素化CD40（氨基酸21-193）、重组CD40L（氨基酸116-261）、Tb标记的供体、染料标记的受体和用于384反应的检测缓冲液。

图1:CD40:CD40L TR-FRET检测试剂盒示意图

将含有铽标记供体、染料标记受体、CD40、CD40L和抑制剂的样品孵育90分钟。然后使用荧光阅读器测量荧光强度。在CD40与CD40L结合的情况下，由于供体和受体的接近，会发生能量转移。结合的破坏导致能量传递的减少。λ=665 nm处的荧光强度直接对应于CD40与CD40L的结合。

艾美捷CD40:CD40L TR-FRET检测：

货号：BPS-79258

同义词：T细胞抗原Gp39，肿瘤坏死因子相关激活蛋白，TRAP，肿瘤坏死因子配体超家族成员5，TNFSF5，CD154，CD40，CD40分子

试剂盒格式：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）

物种：人类

提供形式：该试剂盒以方便的384孔格式提供。

未提供的必需材料：

能够测量时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）的荧光微孔板阅读器

可调节的微量移液器和无菌吸头

UniProt #CD40: P25942; CD40L: P29965

存储/稳定性：如果按照指示存储材料，该试剂盒在收到日期起的6个月内将表现最佳。

使用说明：详见试剂盒数据表的详细协议

应用：

研究酶动力学。

在高通量筛选（HTS）应用中筛选小分子抑制剂。

运输温度：-80°C

CD40:CD40L TR-FRET检测文献参考：

Annis A., et al., 2004 J. Amer. Chem. Soc. 126(4): 15495-15503.

Yan, T., et al., 2001 J. Cellular Biochem. 83(2): 320-325.

Tang T., et al., 2021 Pharmacol The 219:107709.

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