链霉亲和素-生物素相互作用的非凡强度允许有效捕获甚至高度稀释的靶标;然而,它使得从亲和树脂中回收蛋白质具有挑战性。从固定化抗生物素蛋白中洗脱生物素化蛋白质的常规方法包括:(i)通过在可能包括高浓度离液盐的变性缓冲液中煮沸树脂来变性链霉抗生物素蛋白,(ii)当蛋白质与树脂结合时胰蛋白酶消化,或(iii)用过量的游离生物素洗脱蛋白质。这些方案可以通过与标记的蛋白质同时释放非特异性结合的蛋白质和/或天然生物素化的蛋白质来共洗脱污染蛋白质。此外,其中一些方法可能会导致高水平的树脂基肽以及目标蛋白质的洗脱,从而导致进一步的样品污染。
二硫键-生物素-炔烃探针消除了链霉亲和素-生物素亲和纯化的主要限制。该试剂含有通过含有可裂解二硫键的间隔臂与炔基连接的生物素部分。捕获的生物分子可以在温和条件下(50 mM二硫苏糖醇,10 mM 2-巯基乙醇或1%硼氢化钠)有效释放,并且在切割后留在标记蛋白上的小分子片段(143.20 Da)。这些特征使得可切割探针特别有吸引力用于生物分子标记和蛋白质组学研究。
艾美捷Click Chemistry Tools 二硫化物生物素炔烃#CCT-1498规格:
单位规格 1毫克,5毫克,25毫克
分子量 647.87
残留分子量 143.20
化学成分 C27H45N5O7S3
CAS号 不适用(N/A)
溶解性 玻璃状无定形固体
外观 黄色无定形固体至黄色油状物
存储条件 -20°C
运输条件 常温
Click Chemistry Tools 二硫化物生物素炔烃文献参考:
Szychowski, J., et al. (2010). Cleavable Biotin Probes for Labeling of Biomolecules via Azide?Alkyne Cycloaddition. J. Am. Chem. Soc., 132: 18351-60. [PubMed]
Yang Y., et al. (2013). Cleavable Trifunctional Biotin Reagents for Protein Labeling, Capture, and Release. Chem. Commun., 48: 5366-86. [PubMed]
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Click Chemistry Tools(CCT)一直致力于不断开发和扩展一系列连接产品。他们利用特别新的研究成果研发生产出新颖的交联和标记试剂。产品被广泛用于药物研发、癌症治疗以及各类诊断技术等。目前CCT的产品线主要包括:Azides(Biotin-Azides)试剂、Bis-sulfone交联试剂、DBCO试剂、TCO试剂、Terminal Alkyne试剂、Tetrazine试剂、标记试剂盒以及分选用底物等。艾美捷科技是Click Chemistry Tools(CCT)的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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