纳米盘首次由Sligar及其同事描述(1, 2)。它们提供了由膜支架蛋白(MSPs)维持的磷脂双分子层系统。MSPs是载脂蛋白(apo) A-I的截短形式,包裹着一块脂质双分子层,提供一个面向脂质的疏水表面,以及一个外部的亲水表面。这种设置使得纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在无洗涤剂的情况下溶解膜蛋白。这些纳米双层颗粒直径约为7,取决于所使用的MSP变异体。最常用的是MSP1D1、MSP1E3D1和MSP1D1-ΔH5,但也有其他MSP1D1的缺失突变体适用于。最常用的磷脂是二酰亚油磷脂胆碱(POPC)与胆酸钠的组合。Cube Biotech提供纳米盘组装试剂盒,其中包含所需的脂质和胆酸钠。请参阅专用协议以生成纳米盘。它们旨在准备预组装的纳米盘,可添加至细胞。在蛋白质合成过程中,新生的膜蛋白会整合到纳米盘中。根据2毫克MSP蛋白,该协议产生约50微升浓度约为10毫克/毫升的纳米盘,相当于约0.5E.coli细胞提取物,具体取决于膜蛋白的表达速率。这相当于1微升浓缩至0.5毫摩尔的纳米盘溶液。使用这种方法,不需要洗涤剂,最大限度地减少可能的人为因素。在细胞表达系统中获得的产量通常仅限于几微克蛋白,但提供了包括生物素化或同位素标记等修饰的可能性。Cube Biotech提供不同MSP蛋白:脂质组合的预组装纳米盘。此外,Cube Biotech还提供带标签和无标签版本。它们可用于将溶解到洗涤剂胶束中的膜蛋白。纳米盘也是我们膜蛋白服务的重要组成部分。空纳米盘和重组膜蛋白重新组装到纳米盘中均可提供。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐纳米磷脂盘组装试剂盒 MSP1D1_POPC。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
纳米磷脂盘组装试剂盒 MSP1D1_POPC | CBB-26233 | 查看 |
技术细节
MSP1D1蛋白:
纯度:> 90%(SDS-PAGE)
氨基酸数目:201
分子质量:23,329 Da
消光系数(在水中)ε280:23,950 M-1cm-1
棕榈酰-油酰-磷脂胆碱(POPC):
CAS号:26853-31-6
分子质量:760.08 Da
化学式:C42H82NO8P
胆酸钠:
CAS号:361-09-1
分子质量:430.57 Da
化学式:C24H39NaO5
运输与储存
运输温度:常温
冻干组分储存:-20°C,可保存数月
重组组分储存:2-8°C,可保存数天
文献参考:
1. Bayburt, T.H. et al. Reconstitution and imaging of a membrane protein in a nanometer-sizephospholipid bilayer. J. Struct. Biol. (1998), 123(1):37-44
2. Civjan, N.R. et al. Direct solubilization of heterologously expressed membrane proteinsby incorporation into nanoscale lipid bilayers. BioTechniques (2003) 35:556-563
3. Hagn, F. et al. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structuredetermination of membrane proteins. J.Am.Chem. Soc. (2013), 135:1919-1925
4. Proverbio D., et al. Functional properties of cell-free expressed human endothelin A andendothelin B receptors in artifical membrane environments. Biochim.Biophys. Acta (2013),1828(9):2182-92
5. Roos, C., et al. 2014, High-level Cell-free production of membrane proteins with Nanodiscs. In:Alexandrov, K., and Johnston W.A. (eds) Cell-free protein synthesis: Methods and Protocols.Methods in Molecular Biology, vol. 1118, Springer Science+Business Media.
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Cube Biotech以及客户订制化服务。
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