纳米盘是由Sligar及其同事首次描述的(1,2)。纳米盘提供了一个由膜支架蛋白(MSPs)维持的磷脂双分子层系统。MSPs是载脂蛋白(apo)A-I的截短形式,包裹在一块脂双分子层上形成一个类似盘状或纳米盘的粒子(3)。MSPs在脂质面朝向疏水表面,并在外部具有亲水表面。这种设置使得纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在无清洁剂的情况下溶解膜蛋白。这些纳米双分子粒子直径约为7-18 nm,取决于所使用的MSP突变变体。广泛使用的是MSP1D1、MSP1E3D1和MSP1D1-△H5,但MSP1D1的其他突变体也适用于纳米盘的生成(3)。
常用的磷脂是二十烷酰基甘油磷酰胆碱(DMPC)或棕榈酰-油酰-磷脂酰胆碱(POPC),结合十二烷基硫酸钠。Cube Biotech提供MSP1D1、MSP1E3D1和MSP1D1AH5蛋白,既带有his标签又无标签版本。用于无细胞表达反应的预装纳米盘和纳米盘组装套件包含了冻干蛋白和预配脂质和十二烷基硫酸钠的分装量。
MSP蛋白的重组Cube Nanodisc膜支架蛋白以含有20mM Tris pH 7.4、100 mM NaCl、0.5 mM EDTA的溶液冻干交付。每个分装含有2 mg蛋白。加入0.5 mL双蒸馏水将恢复蛋白浓度为4 mg/mL的原始溶液。根据不同的应用方案,这个储备可以进一步稀释。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐MSP 1D 1 dH 5-His,冻干蛋白(10 mg)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
MSP 1D 1 dH 5-His,冻干蛋白(10 mg) | CBB-26126 | 查看 |
技术细节
纯度:>90%(SDS-PAGE)
氨基酸数量:184
分子量:21,468 Da
消光系数(在水中)εzan:19,940 M--cm-?
蛋白质概述和氨基酸序列:
文献参考:
1. Bayburt, T.H. et al. Reconstitution and imaging of a membrane protein in a nanometer-sizephospholipid bilayer. J. Struct. Biol. (1998), 123(1):37-44
2. Civjan, N.R. et al. Direct solubilization of heterologously expressed membrane proteinsby incorporation into nanoscale lipid bilayers. BioTechniques (2003) 35:556-563
3. Hagn, F. et al. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structuredetermination of membrane proteins. J.Am.Chem. Soc. (2013), 135:1919-1925
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Cube Biotech以及客户订制化服务。
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